產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0474 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 肝癌;男性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:MHCC97L 細胞
中文名稱:人低轉(zhuǎn)移細胞
規(guī)格:1×106
種屬:人
來源:;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:T25/瓶
貨號:E0474
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
MHCC97L 細胞 | 1×106 | E0474 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應(yīng)管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復(fù)蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
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小鼠素(Renin)ELISAKit Fexofenadine hydrochloride 153439-40-8 中文名:鹽酸非索非那定 分子式:C32H40ClNO4
小鼠廋素受體 英文名稱: Leptin receptor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Leptin R Labetalol hydrochloride 中文名:鹽酸拉貝洛爾 分子式:C19H25ClN2O3
小鼠廋素 英文名稱: Leptin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Leptin Labetalol hydrochloride 中文名:鹽酸拉貝洛爾 分子式:C19H25ClN2O3 度:98.0%
小鼠松弛素 英文名稱: Mouse Relaxin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: RLN Latinone 79157-36-1 中文名: 分子式:C22H16O5
丁香酚 蕓香糖苷 HPLC≥98% 5mg 魚類受精卵細胞凍存試劑盒(低溫)50
丁香三環(huán)烷二醇 HPLC≥98% 5mg MouseInsulin,INSELISAKit小鼠(INS)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
丁香酸甲酯 HPLC≥98% 5mg 小鼠內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒 ,英文名: VEGF ELISA Kit
豆甾, 二烯– 酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠載脂蛋白E(Apo-E)ELISA檢測試劑盒MouseApolipoproteinE,Apo-EELISAKit 96T/48T
豆甾烯,二酮 HPLC≥98% 5mg 人肌酐(Cr)試劑盒 Human Creatinine,Cr ELISA kit
豆甾,二烯醇 HPLC≥98% 5mg RatcoagulationfactorⅫ,FⅫELISAKit大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豆甾醇葡萄糖甙 HPLC≥98% 5mg 10倍0酸平衡鹽(PBS)緩沖溶液(0.1M)500毫升
豆甾烷,二醇 HPLC≥98% 5mg MouseCompleme4,C4ELISA試劑盒小鼠補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豆甾烷,二酮 HPLC≥98% 5mg 小鼠內(nèi)皮細胞蛋白C受體(PROCR)ELISA試劑盒 ,英文名: PROCR ELISA Kit
杜鵑醇 HPLC≥98% 5mg 兔子神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA檢測試劑盒rabbitNeuron-specificenolase,NSEELISAKit 96T/48T
CTSD Others Human 人 Cathepsin D / CTSD 人細胞裂解液 (陽性對照) Ac-rC亞1酰胺單體Ac-rC Phosphoramidite質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
DLD-1 人結(jié)直腸腺癌上皮細胞Rp-腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯鈉鹽Rp-Adenosine 3′,5′-cyclic Monophosphorothioate, Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
CMVECs微內(nèi)皮細胞 CMVECs micro vascular endothelial cells DMEM+10%FBSSp--腺苷 3′,5′-環(huán)單硫代1酸酯 三乙基銨鹽水合物Sp-Adenosine 3',5'-cyclic monophosphorothioate triethylammonium salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
TNFSF12 Protein Rat 重組大鼠 TNFSF12 蛋白 (Fc 標簽)2-甲基硫代二1酸腺苷2-(Methylthio)adenosine 5'-diphosphate 3 salt hydrate 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
人小梁網(wǎng)細胞(HTMC)(5×105) 3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞 Mouse腺苷-2',3'-環(huán)1酸 三乙基銨鹽Adenosine 2',3'-Cyclic Phosphate Triethylammonium Salt 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
MHCC97L 細胞人平滑肌細胞(HCSMC)(5×105 ) RLF, 大鼠成纖維細胞 Rattus物質(zhì)P(7-11)質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRSubstance P (7-11)
豬腎傳代細胞;IBRS-2TA-0910,他替瑞林質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRTA-0910, taltirelin
CDH13 Others Rat 大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 人細胞裂解液 (陽性對照) 素,游離酸質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRTRH, Free Acid
CL-0157MG-63(人細胞)5×106cells/瓶×2尿皮質(zhì)激素Ⅲ,小鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRUrocortin III, mouse
L-M TK細胞,鼠胸腺激酶缺陷細胞株 人B細胞瘤細胞系,BJAB細胞 小鼠細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]戊基尼泊金質(zhì)量規(guī)格:美國進口Pentyl Paraben
注意事項:
MHCC97L 細胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。