產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E0473 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 肺癌;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
物種來(lái)源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
NCI-H3255 細(xì)胞 | 1×106 | E0473 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):NCI-H3255 細(xì)胞
中文名稱(chēng):人細(xì)胞
規(guī)格:1×106
種屬:人
來(lái)源:;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
單位:T25/瓶
貨號(hào):E0473
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
注意事項(xiàng):
NCI-H3255 細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
以下是公司正在熱銷(xiāo)的相關(guān)產(chǎn)品:
小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)ELISAKit Indometacin 中文名:吲哚美辛 分子式:C19H16ClNO4
小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒 小鼠尿微量蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠尿微量蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠尿微量蛋白試劑盒、小鼠尿微量蛋白elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Fosaprepitant dimeglumine 265121-04-8 中文名: 分子式:C30H40F7N6O10P 度:98.0%
小鼠尿微量白蛋白(ALB)ELISA試劑盒 Fmoc-O-(benzylphospho)-L-threonine 中文名:Fmoc-蘇氨酸磷酸芐酯 分子式:C26H26NO8P 度:98.0%
小鼠尿微量白蛋白 英文名稱(chēng): Mouse Microalbunminuria 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): MAU Linderaspirone A 1235126-46-1 中文名: 分子式:C34H32O10 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
小鼠 英文名稱(chēng): Mouse Blood Urea Niogen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫(xiě): BUN Finasteride 98319-26-7 中文名:非那雄胺 分子式:C23H36N2O2
乙酰氧基(),E勞丹二烯酸 HPLC≥98% 5mg 小鼠腺病毒(ADV)ELISA試劑盒
吲哚甲酸 HPLC≥98% 5mg Rat Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 大鼠鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒
,二甲氧基鐵屎米酮 HPLC≥98% 5mg Humanisociatedehydrogenase,ICDELISAKit 人異檸檬酸脫輕酶(ICD)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
,二甲基羥基苯乙酮 HPLC≥98% 5mg ChickenEpidermalgrowthfactor,EGFELISA試劑盒雞表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
O沒(méi)食子酰巖白菜素 HPLC≥98% 5mg 載玻片細(xì)胞CASPASE-3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20
表可木酸 HPLC≥98% 5mg MousehepatitisBviruseaigen,HBeAgELISAKit小鼠e抗原(HBeAg)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
羥基漢黃芩素 HPLC≥98% 5mg 小鼠線(xiàn)粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)ELISA試劑盒 ,英文名: TFAM ELISA Kit
羥基肉桂酸甲酯 HPLC≥98% 5mg 兔兒茶酚胺(CA)ELISA檢測(cè)試劑盒Rabbitcatecholamine,CAELISAKit 96T/48T
羥基三尖杉?jí)A HPLC≥98% 5mg 牛孕激素/孕酮(PROG)試劑盒 Bovine progesterone,PROG ELISA Kit
,二羥基,,,四甲氧基黃酮 HPLC≥98% 5mg 英文名稱(chēng)HumanEndotheliallipaseELISAKit人內(nèi)皮脂肪酶(EL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP 人成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL壬基-β-D-葡萄吡喃糖甙(>98%,BC)Nonyl β-D-glucopyranoside質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
人癌細(xì)胞;MDA-MB-468N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺Z-Gln-OH質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
人脂肪細(xì)胞-皮下(HPA-s)(1×106 )N-CBZ-L-丙氨酸CBZ-L-Gly質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
CM-R080大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸丙美卡因Proparacaine HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
C3H/An小鼠結(jié)締組織細(xì)胞(L929-TK-);LTK- 小鼠腸平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLN-芐氧羰基-L-絲氨酸Z-Ser-OH質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR
NCI-H3255 細(xì)胞犬腎細(xì)胞;MDCK/IgRDL-甲硫氨酸;蛋氨酸質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRDL-Mine
RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-天冬氨酸質(zhì)量規(guī)格:0.98DL-Aspartic acid
CL-0264C918(人眼脈絡(luò)色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2DL-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Glutamine
HA Others H4N8 甲型 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) DL-beta-苯丙氨酸(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-beta-Phenylalanine
小鼠上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLDL-肉堿鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDL-Carnitine hydrochloride