產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E0439 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 貼壁(無法傳代) |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:Kupffer 細(xì)胞
中文名稱:肝枯否細(xì)胞
規(guī)格:1×106
種屬:
來源:
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁(無法傳代)
單位:T25/瓶
貨號:E0439
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
Kupffer 細(xì)胞 | 1×106 | E0439 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實驗用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實驗提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時細(xì)胞消化適度)進行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細(xì)胞死亡。
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布地奈德(標(biāo)準(zhǔn)品) Budesonide 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 5-ROX蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)
亞葉酸鈣 Calcium Folinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,水合物,BR Mousefractalkine/CX3CL1ELISA試劑盒小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞葉酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品) Calcium Folinate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,含量測定 小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒 ,英文名: DHEA-S7 ELISA Kit
喜樹堿 Camptothecin 質(zhì)量規(guī)格:> 99%,喜樹提取 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA檢測試劑盒MouseIerferonγ,IFN-γELISAKit 96T/48T
喜樹堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Camptothecin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品 人胱天蛋白酶9(Casp-9)試劑盒 Human Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit
卡那替尼 Canertinib 2HCl 質(zhì)量規(guī)格:含量> 99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) RatErythropoietin,EPOELISAKit大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卡培他濱 Capecitabine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 5-TAMRA蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)
卡培他濱(標(biāo)準(zhǔn)品) Capecitabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Mousefreefattyacids,FFAELISA試劑盒小鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
硫酸卷曲霉素 Capreomycin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量≥700IU/mg,BR 小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒
硫酸卷曲霉素(標(biāo)準(zhǔn)品) Capreomycin Sulfate 質(zhì)量規(guī)格:效價測定 Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒
A-498(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2薯蕷皂素Diosgenin質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
HNEpC-c 人鼻粘膜上皮細(xì)胞(HNEpC) 500,000cells 成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)D-半胱氨酸鹽酸鹽一水D-Cysteine hydrochloride monohydrate質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,BR,一水物
膀胱上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)鈣蛋白酶抑制劑II(進口)Calpain Inhibitor II(ALLM)質(zhì)量規(guī)格:≥95%,美國進口
LTA4H Others Mouse 小鼠 Leukoiene A4 Hydrolase / LTA4H 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 炔孕酮/素(標(biāo)準(zhǔn)品)Ethisterone質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人癌細(xì)胞;MDA-MB-453炔孕酮/素Ethisterone質(zhì)量規(guī)格:>98%
Kupffer 細(xì)胞WI-38細(xì)胞,人二倍體胚肺細(xì)胞 人,LTEP-a-2細(xì)胞 QBC-939, 人細(xì)胞N-三甲基硅基乙酰胺(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)N-Trimethylsilylacetamide
貓腎細(xì)胞;CRFK1,1,3,3-四甲基二硅氮烷(>97.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)1,1,3,3-Tetramethyldisilazane
NA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase/NA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-(叔丁基二甲硅基)咪唑(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)1-(tert-Butyldimethylsilyl)imidazole
CL-0386MPC-11(小鼠漿細(xì)胞瘤)5×106cells/瓶×2N-芐氧羰基-L-谷氨酰胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRZ-Gln-OH
EFNB1 Others Rat 大鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) N-CBZ-L-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCBZ-L-Gly
注意事項:
Kupffer 細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。