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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P63917 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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新孢子蟲(chóng)(Ne)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法) |
50T |
BK-P63917 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
小鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISAKit ELISA. 96T/48T Benzoyleneurea 中文名：亞苯甲?；?span> 分子式：C8H6N2O2 度：98.0%
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Horminone 中文名：7α-羥基羅列酮 分子式：C20H28O4 度：97.5%
小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit ELISA. 96T/48T Eplerenone 107724-20-9 中文名：依普利酮 分子式：C24H30O6
小鼠三葉因子3 英文名稱： Mouse efoil Factor 3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TFF3 Herbarin 中文名： 分子式：C16H16O6 度：97.0%
小鼠三腺原酸（T3）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Horminone 21887-01-4 中文名：7α-羥基羅列酮 分子式：C20H28O4 度：97.5% 關(guān)鍵詞： 抗菌; 抗錐蟲(chóng); 新疆鼠尾草; 溪黃草; 二萜醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
CD83 Others Human CD83 / HB15 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 萘普生質(zhì)量規(guī)格：>99%以上，S-構(gòu)型無(wú)結(jié)晶水Naproxen
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-E萘普生（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Naproxen
主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 (HAEC)( 5×105 )鹽酸米諾環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRMinocycline
CL-0019AAV-293(胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2鹽酸米托蒽醌(進(jìn)分)質(zhì)量規(guī)格：進(jìn)分sigma M6545Mitoxantrone HCl
小鼠*瘤細(xì)胞;Sp2/0-Ag14 小鼠完全培養(yǎng)基 100mL鹽酸米托蒽醌質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Mitoxantrone HCl
SPI1 Others Human SPI1 / HAI-1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硫酸鋇(>98%,BR)Barium
sulfate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
無(wú)色素睫狀上皮細(xì)胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μg苯磺酸(>98%,BR)Benzenesulfonic acid質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
大鼠纖維細(xì)胞(RLF)(5×105)安息香(>98%,BR)Benzoin質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
非洲綠猴腎細(xì)胞;CV-1二苯甲酮腙(>98%,BR)Benzophenone hydrazone質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性瘤株;L615 小鼠腎足突細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL氯化鉍(>98%,BR)Bismuth (III) chloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
Parecoxib
198470-85-8 中文名：帕瑞考昔鈉 分子式：C19H17N2NaO4S 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISAKit ELISA.
96T/48T
p-Anisoin 119-52-8 中文名：對(duì)茴香偶姻 分子式：C16H16O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
p-Anisil 1226-42-2 中文名：茴香偶酰 分子式：C16H14O4 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Panaxyne 122855-49-6 中文名： 分子式：C14H20O2 度：97.0% 關(guān)鍵詞： 細(xì)胞毒活性; 聚乙炔; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù) 小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Panaxydiol 63910-76-9 中文名： 分子式：C17H24O2 度：% 關(guān)鍵詞： 小鼠雄烯二(ASD)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative
real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
新孢子蟲(chóng)(Ne)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
