產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E0579 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 骨巨細(xì)胞瘤 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
免疫類(lèi)型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 貼壁 |
物種來(lái)源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng):GCT0404細(xì)胞
中文名稱(chēng):人細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來(lái)源:
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號(hào):E0579
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
GCT0404細(xì)胞 | 瓶 | E0579 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠(chǎng)等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀(guān)察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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小鼠癌標(biāo)志物CA125ELISAKit Brinzolamide 138890-62-7 中文名:布林佐胺 分子式:C12H21N3O5S3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠阿立新A(OrexinA)ELISA試劑盒 Bortezomib 179324-69-7 中文名:硼替佐米 分子式:C19H25BN4O4 度:98.0%
小鼠γ基(GABA)ELISA試劑盒 Boldenone undecylenate 中文名:寶丹酮十一烯酸酯 分子式:C30H44O3
小鼠γ基(GABA)ELISAKit Boldenone undecylenate 13103-34-9 中文名:寶丹酮十一烯酸酯 分子式:C30H44O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白elisa試劑盒 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白試劑盒、小鼠γ干擾素誘導(dǎo)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Boldenone acetate 2363-59-9 中文名:寶丹酮醋酸酯 分子式:C21H28O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
氟達(dá)拉賓(標(biāo)準(zhǔn)品) Fludarabine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 MouseIerleukin9,IL-9ELISA試劑盒小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
G-418 硫酸鹽 G-418 disulfate,Geneticin 質(zhì)量規(guī)格:>500U/mg,BR 小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)ELISA試劑盒 ,英文名: NF-L ELISA Kit
埃羅替尼 Erlotinib 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 96T/48T
N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC) N-Acetyl-cysteine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人甘油二酯(DAG)試劑盒 Human diacylglycerol,DAG ELISA kit
佐匹克隆 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BP2009,BR RatImmunoglobulinG,IgGELISAKit大鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
佐匹克隆(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50
阿尼西坦,回拉西坦;茴拉西坦 Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:≥99%,BR MouseIerleukin-2receptor,IL-2RELISA試劑盒小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿尼西坦(標(biāo)準(zhǔn)品) Aniracetam 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)ELISA試劑盒 ,英文名: NF ELISA Kit
L-谷氨酰胺 L-Glutamine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA檢測(cè)試劑盒Mouseangiopoietieceptoie2,ANG-R-Tie2ELISAkit 96T/48T
羅氟司特 Roflumilast 質(zhì)量規(guī)格:含量≥99.0%(HPLC) 人甘露糖受體(MR)試劑盒 Human mannose receptor,MR ELISA Kit
IFNB1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)羥苯磺酸鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)Calcium dobesilate質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
HPAC(人胰腺腺泡上皮癌) 5×106cells/瓶×2 短小芽孢桿菌異鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
角膜內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
GRK5 Others Human 人 GRK5 / GPRK5 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 甲氨蝶呤二甲基酯Methotrexate Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
人肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292甲氨蝶呤-甲基-d3,二甲基酯Methotrexate-methyl-d3, Dimethyl Ester質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
GCT0404細(xì)胞RAB27B Others Human 人 RAB27B 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Δ2-頭孢他啶質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Δ2-Ceftazidime
CL-0077Eca-109(人細(xì)胞)5×106cells/瓶×2頭孢他啶五水化合物質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Ceftazidime Pentahydrate
Wish細(xì)胞,人羊膜細(xì)胞系 人T細(xì)胞瘤,Hat-78細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A2頭孢唑啉質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Cefazolin
BGC823(人細(xì)胞) 5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口Fluticasone 17β-Carboxylic Acid
CTSB Others Human 人 Cathepsin-B / CTSB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 頭孢羥氨芐 質(zhì)量規(guī)格:>950μg/mg,BRCEFADROXIL
注意事項(xiàng):
GCT0404細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類(lèi)、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。