產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E01207 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 急性B淋巴細(xì)胞白血病;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
品系 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 懸浮 |
物種來(lái)源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:CEMO-1細(xì)胞
中文名稱:人急性B淋巴細(xì)胞細(xì)胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來(lái)源:急性B淋巴細(xì)胞;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):懸浮
單位:
貨號(hào):E01207
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
CEMO-1細(xì)胞 | 瓶 | E01207 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來(lái)講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過(guò)量不足,過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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氫二鈉七水 phosphate, dibasic, heptahydrate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseMucin-5subtypeAC,MUC5ACELISA試劑盒小鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
dATP溶液(100 mM) dATP 100 mM solution 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠破骨細(xì)胞分化因子(ODF)ELISA 試劑盒
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瓊脂糖(美侖電泳級(jí)) Agarose 質(zhì)量規(guī)格:美侖,電泳級(jí) Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
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植物血凝素 Phytohemagglutinin 質(zhì)量規(guī)格:BR 真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒10/20
6-糠基氨基嘌呤,激動(dòng)素 Kinetin,6-Furfurylaminopurine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit小鼠B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
乙二醇雙(2-氨基乙基醚)四乙酸 EGTA, egtazic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠蘋果酸脫氫酶(MDH)ELISA試劑盒 ,英文名: MDH ELISA Kit
無(wú)水二氫鈉(分子生物學(xué)級(jí)) phosphate, monobasic, anhydrous 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學(xué)級(jí) 小鼠白介素1(IL-1)ELISA檢測(cè)試劑盒MouseIerleukin1,IL-1ELISAKit 96T/48T
月桂酰基肌氨酸鈉(分子生物學(xué)級(jí)) lauroyl sarcosine 質(zhì)量規(guī)格:>95%,分子生物學(xué)級(jí) 人分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)試劑盒 Human CHGB/SCG1 ELISA kit
F9 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor IX / FIX / F9 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 4,4'-異亞丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(HPLC)(T)
HL-60 人原髓細(xì)胞細(xì)胞四溴雙酚A(>98.0%(GC)(T))Tetrabromobisphenol A質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)(T)
COLO 320DM 人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞 COLO 320DM human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS2-乙酰氨基-2-脫氧-D-半乳糖醛酸2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
PGF Protein Mouse 重組小鼠 PIGF / PLGF 蛋白2-去乙氧基-2-羥基-1氫-1-乙基坎地沙坦酯2-Desethoxy-2-hydroxy-1H-1-Ethyl Candesartan Cilexetil質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
大鼠周神經(jīng)成纖維細(xì)胞(RPNF)(5×105) HEC-1A, 人細(xì)胞系 Human坎地沙坦酯甲氧基類似物Candesartan Cilexetil Methoxy Analogue質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
CEMO-1細(xì)胞NCR2 Others Human 人 NKp44 / NCR2 / CD336 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) Delta-催激素質(zhì)量規(guī)格:>95%,BRDelta-MSH
小鼠樹突狀細(xì)胞細(xì)胞;DCS內(nèi)皮素2,人,犬質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREndothelin 2 (human, canine)
CD300LG Others Human 人 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 內(nèi)皮素3,人,大鼠質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREndothelin 3, human, rat
SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 SK-N-BE (2) in human neuroblastoma cell MEM 45%+/F12 45%+10% FBS趨嗜曙紅細(xì)胞肽質(zhì)量規(guī)格:>95%,BREosinophilotactic Peptide
TG-905細(xì)胞,人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 熒光假單胞菌 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞總RNAHVT NA結(jié)晶玫瑰(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRα-(Trichloromethyl)benzyl acetate
注意事項(xiàng):
CEMO-1細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太?。?/span>
(5)嚴(yán)格的無(wú)菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。