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帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：LN382細(xì)胞
中文名稱：人腦細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01339

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。

注意事項(xiàng)：
LN382細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

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酚藍(lán)  Bromophenol blue  質(zhì)量規(guī)格：IND 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒

固藍(lán)B  Fast Blue B Salt  質(zhì)量規(guī)格：BS Rat soluble P selectin (sP-selectin) ELISA Kit 大鼠可溶性P選擇素(sP-selectin)ELISA試劑盒

阿利新藍(lán)8GX  Alcian blue 8GX  質(zhì)量規(guī)格：BS級(jí),干品含量>50% Humanneuronalapoptosisinhibitoryprotein,NAIPELISAKit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

四氮唑藍(lán)；BT  Blue tetrazolium  質(zhì)量規(guī)格：BS Humanai-Endostatinaibody,ES-AbELISA試劑盒人內(nèi)皮抑素抗體(ES-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

噻唑藍(lán);MTT  MTT  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 植物堿性焦0酸酶(AlkalinePyrophosphatase)活性比色法法定量檢測(cè)試劑盒20

紅  ALLURA RED AC  質(zhì)量規(guī)格：BS Humanvionectin,VELISAKit人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

亮藍(lán)  Erioglaucine di salt  質(zhì)量規(guī)格：85%,BS 小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF2 ELISA Kit
BxPc-3-EGFP-puro (慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人原位胰腺腺癌細(xì)胞 BxPc-3-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) in situ pancreatic adenocarcinoma cells 1640+10% FBS+2μg/ml puromycin1酸二酯酶 (比活度：>20 U/mg，BC)質(zhì)量規(guī)格：比活度：>20 U/mg，BCPhosphodiesterase I from Crotalus adamanteus Venom

IL2 Protein Human 重組人 Ierleukin-2 / IL-2 蛋白化丙啶(>95% (HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格：>95% (HPLC),BCPropidium iodide

人食道上皮細(xì)胞(HEEC)(5×105 ) RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元 Rattus緊張素III質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRAngiotensin III,human

大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3蜂毒明肽; 蜂針液明肽質(zhì)量規(guī)格：BR,>97%Apamin

EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 枸櫞酸氯米芬,克羅米芬質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRClomiphene
LN382細(xì)胞GB Others Cytomegalovirus/CMV 巨細(xì)胞病毒 HCMV gB 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 雷尼替丁雜質(zhì)B質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Ranitidine Impurity B

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B6雷尼替丁質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Ranitidine

CD59A Others Mouse 小鼠 CD59a / Protectin / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 2-氨基-5,6-二氯-3(4H)-喹唑啉醋酸(阿那格雷雜質(zhì)B)質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口2-Amino-5,6-dichloro-3(4H)-quinazoline Acetic Acid(Anagrelide Impurity B)

C26瘤 3-羥基阿那格雷質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口3-Hydroxy Anagrelide

THLE-3人肝永生化細(xì)胞 THLE-3 human liver immortalized cell MD 21793的BEGM培養(yǎng)基(目錄號(hào)CC3170)雷洛昔芬4'-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Raloxifene 4'-Glucuronide