產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E01456 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 膠質(zhì)瘤;男性 |
細胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:T98細胞
中文名稱:人腦膠質(zhì)細胞瘤細胞
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號:E01456
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
T98細胞 | 瓶 | E01456 |
帛科細胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細胞培養(yǎng)板、細胞反應管、搖瓶、細胞培養(yǎng)瓶、細胞工廠等,更大就是反應器了。
帛科細胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時用(如單克隆細胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細胞實驗用(一般性的傳代,保存細胞,為實驗提供細胞等),25ml一般是用來復蘇細胞或細胞較少時的培養(yǎng),還有做原代細胞時也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項:
1.細胞復蘇
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。將融化的細胞移入離心管中,加入37oC預熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細胞傳代
帛科細胞密度達到80%~90%(過量不足,過晚細胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細胞一代,即從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時間,非細胞有絲分裂次數(shù))時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細胞:倒置顯微鏡下觀察消化細胞,若胞質(zhì)回縮,細胞之間不再連接成片,表明此時細胞消化適度)進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細胞凍存
當細胞密度達到80%~90%時,去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細胞凍存過程中提供非滲透性保護物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護細胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個月。
細胞凍存和復蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細胞的活力。凍存細胞不加任何保護劑,會導致細胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進而促使細胞死亡。
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酚試劑(3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙鹽酸鹽) 3-Methyl-2-benzothialinone 質(zhì)量規(guī)格:AR,>98% HumanVitaminE,VEEELISAKit人維生素E(VE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
米格列醇 Miglitol 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠剪接因子3B亞基3(SF3B3)ELISA試劑盒 ,英文名: SF3B3 ELISA Kit
米格列醇(標準品) Miglitol 質(zhì)量規(guī)格:GC>98%,標準品 人苯氨酸(LPA)ELISA檢測試劑盒HumanL-phenylalanine,LPAELISAKit 96T/48T
1-萘酚酞 1-Naphtholphthalein 質(zhì)量規(guī)格:進口原裝,>98% 大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)試劑盒 Rat Thymosin beta-4,TMSB4X ELISA kit
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鹽酸達泊西汀(右旋) Dapoxetine hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格:>99%,右旋 骨組織固著液50毫升
固黑K鹽 Fast Black K Salt 質(zhì)量規(guī)格:>80%,BR ELISAKitGLP-1人胰素樣肽1規(guī)格:48T/96T
氨基黑10B Amido black 10B 質(zhì)量規(guī)格:AR 小鼠間隙連接蛋白43(CX43)ELISA試劑盒 ,英文名: CX43 ELISA Kit
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1氟草胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品Benfluralin
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T98細胞FZD4 Others Rat 大鼠 Frizzled-4 / FZD4 人細胞裂解液 (陽性對照) 乙酰螺旋霉素質(zhì)量規(guī)格:>1200u/mg,CP2005Acetylspiramycin
成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)尼羅替尼質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRNilotinib
Daudi細胞,人細胞 小鼠腎足細胞,Mouse podocyte細胞 骨骼肌細胞培養(yǎng)基SkMCM-prf草酸銅(>97%,Tech Grade)質(zhì)量規(guī)格:>97%,工業(yè)級Copper(II) oxalate hydrate
NCI-H157(人非小細胞) 5×106cells/瓶×2無水硫酸銅(>99%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCopper(II) sulfate, anhydrous
BEL-7404(人細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M006小鼠完全培養(yǎng)基100mL 人成細胞;Saos-2肌1;肌酐質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRCreatinine
注意事項:
T98細胞(1)預熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴格的無菌操作;
(6)貼壁細胞消化適度:消化的時間受消化液的種類、配制時間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應該注意培養(yǎng)細胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進行一種細胞的操作,每種細胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細胞瓶口每次打開或者關閉都需要在酒精燈上消毒。