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產(chǎn)品簡稱：CCC-HPF-1細(xì)胞
中文名稱：人胚

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：肺；成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01275

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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頭孢唑啉,唑啉頭孢菌素  Cefazolin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR PlaVitaminD2,VD2ELISA試劑盒植物維生素D2(VD2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

頭孢唑啉(標(biāo)準(zhǔn)品)  Cefazolin  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒

文多靈(標(biāo)準(zhǔn)品）  Vindoline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Rat soluble iercellular adhesion molecule 1 (sICAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒

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苯甲酰新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Benzoylmesaconine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-Histoneaibody,AHAELISA試劑盒人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

葫蘆巴堿（標(biāo)準(zhǔn)品）  Trigonelline  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性熒光定量檢測試劑盒20

琥珀酸；丁二酸  Succinic acid  質(zhì)量規(guī)格：AR,>99% HumanVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor2,VEGFR-2/Flk-1ELISAKit人內(nèi)皮細(xì)胞生長因子受體3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

琥珀酸；丁二酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Succinic acid  質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA試劑盒 ，英文名： MMP-4 ELISA Kit

α-乳香酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  alpha-Boswellic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 大鼠分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒RatsecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit 96T/48T

野馬追內(nèi)酯A（標(biāo)準(zhǔn)品）  Eupalinolide A  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)試劑盒 Human iFABP ELISA Kit
CD2 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 環(huán)苯扎林鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRCyclobenzaprine HCl

人Wilms細(xì)胞;G401鹽酸美托咪定質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%,BRMedetomidine HCl

貓星形腦膠質(zhì)細(xì)胞;PG-4(S+L-) 整合SV40基因的上皮細(xì)胞，HBL-100細(xì)胞 CCC-SMC-1細(xì)胞，兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞托吡酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Topiramate

人B母細(xì)胞;HMy2.CIRVX-680/MK0457，陶扎色替質(zhì)量規(guī)格：>99%,pan-Aurora抑制劑Tozasertib，VX-680/MK-0457

CD5L Others Human 人 CD5L / API6 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 曲司氯銨質(zhì)量規(guī)格：>99%,EP6,BRTrospium chloride
CCC-HPF-1細(xì)胞EM1 Others Human 人 EM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 1-氨基海因鹽酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品1-Aminohydantoin Hydrochloride

CL-0256AM(人腺樣囊性癌細(xì)胞(高轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2人促腎上腺皮質(zhì)激素(1-24),替可克肽質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRACTH (1-24), human

SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 緩激肽質(zhì)量規(guī)格：>98%Bradykinin

小鼠胰腺上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLCEP-18770質(zhì)量規(guī)格：>98.5%CEP-18770

B16小鼠色素瘤細(xì)胞 B16 mouse melanoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS地馬格列質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,BRManaglinat Dialanetil/CS-917
注意事項(xiàng)：
CCC-HPF-1細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。