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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：HHL-5細(xì)胞
中文名稱：人胚胎肝細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：肝；HPV16轉(zhuǎn)化；男性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01284

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

快速真菌DNA提取試劑盒   50T  3-O-Methyl-Estrone  中文名：3-氧甲基基雌酮  分子式：C19H24O2  度：98.0%

快速H－E組織細(xì)胞及脫落細(xì)胞染液   Phosphate buffer                 3-Amino-3-phenyl-1-propanol  中文名：3-氨基-3-苯基-1-丙醇  分子式：C9H13NO 

跨膜蛋白100   英文名稱：   Human ansmembrane protein 100   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   TMEM100  Ritonavir  中文名：利托那韋  分子式：C37H48N6O5S2 

病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T  Phenformin hydrochloride  中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5 

病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測(cè)試劑盒(-PCR法)   48T  Phenformin hydrochloride  834-28-6  中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5  度：98.0%
A66,p110α抑制劑  A66  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR ELISAKitPGF人血小板生長(zhǎng)因子規(guī)格：48T/96T

SC-514;IKK-2抑制劑  SC514  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌酸激酶(CK)ELISA試劑盒 ，英文名： CK ELISA Kit

γ-環(huán)糊精   γ-Cyclodextrin  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA檢測(cè)試劑盒RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 96T/48T

甲基倍他環(huán)糊精,2,6-二甲基-β-環(huán)糊精  Me-β-CD  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 人不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)試劑盒 Human asymmeical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit

埃博霉素B；帕土匹龍  Epothilone B(EPO906, Patupilone)   質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR RatThyroglobulin,TGELISAKit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BMS-345541  BMS345541  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR L-谷氨酰-α-萘酰胺(L-Glamyl-α-naphthylamide)1克

IKK-16,選擇性IKK抑制劑  IKK16  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISA試劑盒豬生成素1(ANG-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

曲格列汀琥珀酸鹽   Trelagliptin succinate；SYR-472  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 小鼠肌生成抑制素(MSTN)ELISA試劑盒 ，英文名： MSTN ELISA Kit

2-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇  2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol   質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口原裝 大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA檢測(cè)試劑盒RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 96T/48T

2'-脫氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷  2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine    質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口原裝,97% 人補(bǔ)體因子I(CFI)試劑盒 Human CFI ELISA Kit
小鼠海馬神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse促胰液素;胰泌素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRSecretin Acetate

FOLR1 Others Human 人 FOLR1 / Folate receptor alpha 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 麝香草酚質(zhì)量規(guī)格：ARThymol

艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich替卡格雷質(zhì)量規(guī)格：>99%,II晶型Ticagrelor

TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GI / TNFRSF18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 替卡格雷(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,光學(xué)度>97%,標(biāo)準(zhǔn)品Ticagrelor

U-2 OS人細(xì)胞 U-2 human osteosarcoma cell line OS McCoy's 5A+10%FBS鹽酸雷莫司瓊質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRRamosetron HCl
HHL-5細(xì)胞EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞(傣族);KM9405青蒿琥酯（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,含量測(cè)定Artesunate

Hepa 1-6細(xì)胞，細(xì)胞 人結(jié)細(xì)胞,HCT116細(xì)胞 CM-H012人平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL青蒿琥酯質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BRArtesunate

大鼠肝細(xì)胞瘤;H4-II-E-C3舒必利（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測(cè)定Sulpiride

CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 沙丁胺醇（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Salbutamol

心肌細(xì)胞培養(yǎng)基CMM硫酸壯觀霉素四水化合物質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口Spectinomycin sulfate tetrahydrate
注意事項(xiàng)：
HHL-5細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。