產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64579 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | % |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
立克次氏體通用PCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64579 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Sennoside B 128-57-4 中文名:番瀉苷B 分子式:C42H38O20 度:95.5% 關(guān)鍵詞: ; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit ELISA. 96T/48T Tenofovir 147127-20-6 中文名:泰諾福韋 分子式:C9H14N5O4P
豬纖溶酶原激活物抑制因子elisa試劑盒 豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T Sennoside A 81-27-6 中文名:番瀉苷A 分子式:C42H38O20
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Sennoside B 128-57-4 中文名:番瀉苷B 分子式:C42H38O20
豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit ELISA.
96T/48T Sertaconazole 中文名:舍他康唑 分子式:C20H15Cl3N2OS 度:98.0%
腸平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)厄貝沙坦質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,Angiotensin
II受體抑制劑Irbesartan
BTC Others Human BTC / Betacellulin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基甲基)-胸苷-3'-O-丁二酸質(zhì)量規(guī)格:BR,原裝進(jìn)口5'-O-(4,4'-Dimethoxytrityl)-thymidine-3'-O-succinic acid
B細(xì)胞瘤細(xì)胞;RAMOS120;7-氨基-4-甲基(AMC)質(zhì)量規(guī)格:>97%7-Amino-4-methylcoumarin
293E細(xì)胞,穩(wěn)定表達(dá)EBNA1的胚腎細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞,CTLA4 Ig-24細(xì)胞 CL-0286M1(小鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2Duvelisib (IPI-145)質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性的PI3K δ/γ抑制劑IPI-145 (INK1197)
A2(腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×25-溴-4-氯-3吲哚神經(jīng)氨酸鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,美國進(jìn)口X-NeuNAc
腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞;NCI-H295R萊苞迪甙D(標(biāo)準(zhǔn)品)Rebaudioside D質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95.50%,標(biāo)準(zhǔn)品
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 老鸛草素(標(biāo)準(zhǔn)品)Geraniin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
直平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL酪醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Tyrosol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
L1210細(xì)胞,小鼠細(xì)胞 多形擬桿菌 大額牛腎細(xì)胞;BFR-K1雷酚內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)Triptophenolide質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CCL24 Protein Human 重組 CCL24 / Eotaxin-2 / MPIF-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)雷公藤紅素(標(biāo)準(zhǔn)品)Celastrol質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Phenformin
中文名:鹽酸苯乙雙胍 分子式:C10H16ClN5 中文名稱 方法 規(guī)格
Phenformin 中文名:苯乙雙胍 分子式:C10H15N5 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Perospirone 中文名:鹽酸哌羅匹隆 分子式:C23H31ClN4O2S 大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Periplogenin 中文名:杠柳苷元 分子式:C23H34O5 大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Periplocoside O 中文名:北五加皮苷O 分子式:C36H56O10 中文名稱 方法 規(guī)格
立克次氏體通用PCR試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。