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細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過(guò)夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。

產(chǎn)品簡(jiǎn)稱(chēng)：KRC/Y細(xì)胞
中文名稱(chēng)：人細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：腎透明細(xì)胞癌；女性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01491

注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過(guò)久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
KRC/Y細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過(guò)度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱(chēng)取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱(chēng)取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過(guò)夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿(mǎn)懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓?xiě)乙毫魅肱赃叢壑小?/span>
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒(méi)有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說(shuō)明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長(zhǎng)）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

Glaraldehydesolion   500ml  Anthraquinone  84-65-1  中文名：蒽醌  分子式：C14H8O2 

Glaraldehydesolion   500ml                 Anthraglycoside B  中文名：大黃素-8-O-葡萄糖苷  分子式：C21H20O10 

G-418抗菌素   1g  4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O  度：98.0%

G-418Sulfate   5g                 4,4'-Bis(diethylamino)benzophenone  中文名：四乙基米氏酮  分子式：C21H28N2O 

FuchsinAcid   25g  4,4'-Cyclohexylidenebisphenol  843-55-0  中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚  分子式：C18H20O2
氨基三乙酸（標(biāo)準(zhǔn)品）  Nitrilotriacetic acid  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法雜質(zhì)檢查用 ELISAKitCyclin-D3人細(xì)胞周期素D3規(guī)格：48T/96T

1，3-（標(biāo)準(zhǔn)品）  1,3- Propylene Glycol  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 小鼠甘酸脫氫酶(GLDC)ELISA試劑盒 ，英文名： GLDC ELISA Kit

二甘醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diethylene Glycol  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanbasicfetoprotein,BFPELISAKit 96T/48T

氯噻嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）  Chlorothiazide  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 大鼠三甲狀腺原氨酸(T3)試劑盒 Rat i-iodothyronine,T3 ELISA Kit

鹽酸阿米洛利雜質(zhì)（4-氨基-6-氯-1，3-苯基二硫酰胺）（標(biāo)準(zhǔn)品）  4-amino-6-chloro-1,3-benzenedisulfonamide  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 英文名稱(chēng)RatthrombieceptorELISAKit大鼠凝血酶受體()規(guī)格：96T/48T

鹽酸地芬尼多雜質(zhì)（烯化合物)（標(biāo)準(zhǔn)品）  Alkene  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測(cè)定試劑盒10

N-甲基帕羅西?。?biāo)準(zhǔn)品）  N-Methylparoxetine  質(zhì)量規(guī)格：供檢查用 ELISAKitMEPE人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白規(guī)格：48T/96T

七氟烷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Sevoflurane  質(zhì)量規(guī)格：供GC法檢查用 小鼠甘露糖受體C2(MRC2)ELISA試劑盒 ，英文名： MRC2 ELISA Kit

二甲氧芐啶（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diaveridine  質(zhì)量規(guī)格：檢查 人副甲狀旁腺激素相關(guān)肽(PTHrp)ELISA檢測(cè)試劑盒Humanparathyroidhormonerelatedpeptide,PTHrpELISAKit 96T/48T

美雄諾龍（標(biāo)準(zhǔn)品）  Mestanolone  質(zhì)量規(guī)格：供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 大鼠山梨醇脫氫酶(SDH)試劑盒 Rat sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit
5. 口腔細(xì)胞系統(tǒng)百里香酚藍(lán)(IND)質(zhì)量規(guī)格：INDThymolblue

CL-0415PLC/PRF/5(人亞力山大細(xì)胞)5×106cells/瓶×2百里香酚藍(lán)(ACS reagent,95 %)質(zhì)量規(guī)格：ACS reagent,95 %Thymolblue

人T細(xì)胞細(xì)胞;HuT 78 大鼠大隱內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL羅氟司特(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99.0%,標(biāo)準(zhǔn)品Roflumilast

C127 小鼠細(xì)胞5'-三1酸腺苷(ATP)質(zhì)量規(guī)格：>95.0%(HPLC),BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)Adenosine triphosphate

CD160 Others Human 人 CD160 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 布林佐胺質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP33,BRBrinzolamide
KRC/Y細(xì)胞CDH12 Others Human 人 CDH12 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 丙二酸(AR)Malonate質(zhì)量規(guī)格：>99.5%,AR

人滑膜細(xì)胞HS氯化錳四水Manganese (II) chloride, tetrahydrate質(zhì)量規(guī)格：>98%

EPHA4 Others Rat 大鼠 EphA4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 干酪素Casein質(zhì)量規(guī)格：BR

大鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL醫(yī)用凡士林Vaseline質(zhì)量規(guī)格：BR

HMy2.CIR人B母細(xì)胞 HMy2.CIR human B lymphoblastoid cell IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+20%FBS原釩酸鈉 orthovanadate質(zhì)量規(guī)格：>96%,BR
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。