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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：BE(2)-M17細(xì)胞
中文名稱：人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來(lái)源：神經(jīng)母細(xì)胞瘤

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E01190

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來(lái)講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過(guò)表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來(lái)復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過(guò)量不足，過(guò)晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來(lái)講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過(guò)程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過(guò)夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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Human thrombin activatable fibrinolysis inhibitor / thrombin activatable fibrinolysis inhibitor (TAFI)ELISA Kit 人纖溶抑制因子/凝血酶激活的纖溶抑制物(TAFI)ELISA試劑盒  1-Actamido-3,5-dimethyladmantane  19982-07-1  中文名：  分子式：C14H23NO 

Human sP53 Kit   作用：   ELISA   規(guī)格：   96T   法國(guó) Diaclone     3-Methoxyfuran  中文名：  分子式：C5H6O2 

Human signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子7(Smad7)ELISA試劑盒  (S)-4-Benzyl-2-oxazolidinone  中文名：(S)-4-芐基-2-噁唑烷酮  分子式：C10H11NO2 

Human signal ansduction molecule (Smad1) ELISA Kit 人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒  (S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol  931114-98-6  中文名：  分子式：C10H10O2 

Human sex hormone binding globulin (SHBG) ELISA Kit 人性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒  (S)-4-(4-Aminobenzyl)-2(1H)-oxazolidinone  152305-23-2  中文名：(s)-4-(4-氨基芐基)-1,3-噁唑烷-2-酮  分子式：C10H12N2O2
氨丁三醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  TRISTEARIN  質(zhì)量規(guī)格：鑒別 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratthrombospondin1,TSP-1ELISAKit 96T/48T

鹽酸替扎尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tizanidine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 人白介素32(IL-32)試劑盒 Human Ierleukin 32,IL-32 ELISA Kit

Tubastatin A HCL  Tubastatin A Hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：>98%,HDAC6抑制劑 人高香草酸(HVA)ELISAKit人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸莫索尼定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Moxonidine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 PAR-2蛋白共沉淀分析試劑盒5

鹽酸丙哌維林（標(biāo)準(zhǔn)品）  Propiverine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 PorcineOrexieceptor,OXRELISA試劑盒豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

鹽酸阿可樂(lè)定/鹽酸安普樂(lè)定（標(biāo)準(zhǔn)品）  Apraclonidine hydrochloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 小鼠干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)ELISA試劑盒 ，英文名： IRF3 ELISA Kit

他扎羅汀（標(biāo)準(zhǔn)品）  Tazarotene  質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定 人β乳球蛋白(β-Lg)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanβLactoglobulin,β-LgELISAKit 96T/48T

他扎羅汀  Tazarotene  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)的酪氨酸激酶1型受體(NK1)試劑盒 Rat neuroophic tyrosine kinase, receptor, type 1,NK1 ELISA kit

靈芝酸D(標(biāo)準(zhǔn)品)  Ganoderic acid D  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱RatPAPELISAKit大鼠酸性0酸酶(PAP)規(guī)格：96T/48T

鹽酸左西替利嗪（標(biāo)準(zhǔn)品）  Levoceitrizine HCl  質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 活體細(xì)胞半胱氨酸蛋白酶-5(CASPASE-5)活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒20
EFNB1 Others Human 人 EphrinB1 / EFNB1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 紅菲咯啉(>99.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(T)Bathophenanthroline

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;Mao4,7-二羥基-1,10-菲啰啉(>98.0%(HPLC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)4,7-Dihydroxy-1,10-phenanthroline

二：大鼠正常細(xì)胞硫酸長(zhǎng)春質(zhì)堿質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRCatharanthine sulfate

CM-H064人腎上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸長(zhǎng)春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Catharanthine sulfate

小鼠網(wǎng)織細(xì)胞;M5076 小鼠腸巨噬細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL康普瑞汀質(zhì)量規(guī)格：>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)Combretastatin A4
BE(2)-M17細(xì)胞CKMT1A Others Human 人 CKMT1A 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 整列式復(fù)壁碳納米管 10-20nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Aligned Multi-walled 10-20nm(diam.), 5-15μm(length)

原代軟骨細(xì)胞特制無(wú)血清添加劑Many types of cells包裝：1ml復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>97%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.), 5-15μm(length)

MSC, 小鼠雪旺細(xì)胞 小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞，PT67細(xì)胞 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1](細(xì)胞)復(fù)壁碳納米管 10-30nm(直徑),1-2μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 10-30nm(diam.), 1-2μm(length)

人巨細(xì)胞細(xì)胞株;Mo7e復(fù)壁碳納米管 20-40nm(直徑),5-15μm(長(zhǎng)度)質(zhì)量規(guī)格：>95%(TPO Method)Carbon Nanotube Multi-walled 20-40nm(diam.), 5-15μm(length)

CD200R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200R / OX2-R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 腐植酸，腐殖酸質(zhì)量規(guī)格：>90%,BRHumic acid
注意事項(xiàng)：
BE(2)-M17細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過(guò)程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開(kāi)或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。