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產(chǎn)品簡稱：Daoy細(xì)胞
中文名稱：人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：成神經(jīng)管細(xì)胞瘤；男性

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E01321

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

Periplogenin  中文名：杠柳苷元  分子式：C23H34O5  度：98.0%  兔A1celisa試劑盒   兔A1c試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔A1c試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔A1c試劑盒、兔A1c elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Periplocogenin  中文名：  分子式：C28H42O6  度：98.0%  兔胎盤生長因子elisa試劑盒   兔胎盤生長因子試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔胎盤生長因子試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔胎盤生長因子試劑盒、兔胎盤生長因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  

Wallicoside  中文名：斷節(jié)參苷  分子式：C61H98O26  度：98.0%  兔纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA試劑盒  

Periplocoside N  中文名：  分子式：C27H44O6  度：98.0%  兔細(xì)胞間粘附分子1（ICAM-1）ELISA試劑盒  

Trillin  中文名：延齡草苷  分子式：C33H52O8  度：99.0%  兔透明質(zhì)酸(HA)ELISA試劑盒
脂酰布洛芬-β-D-葡萄糖苷酸  Ibuprofen Acyl-β-D-glucuronide   質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MousemajorhistocompatibilitycomplexELISAKit小鼠組織相容性復(fù)合物(MHC)規(guī)格：96T/48T

外消旋2-羥基布洛芬  rac 2-Hydroxy Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseMBPELISAKit小鼠髓0脂堿蛋白(MBP)規(guī)格：96T/48T

1-羥基布洛芬(布洛芬雜質(zhì)))(非對映)  1-Hydroxy Ibuprofen (Ibuprofen Impurity L)(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseMD2ELISAKit小鼠髓樣分化蛋白-2(MD2)規(guī)格：96T/48T

1-含氧的布洛芬  1-Oxo Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseMGα1ELISAKit小鼠α1微球蛋白(MGα1)規(guī)格：96T/48T

羧酸布洛芬(非對映)  Ibuprofen Carboxylic Acid(Mixture of Diastereomers)  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseMGβ2ELISAKit小鼠β2微球蛋白(MGβ2)規(guī)格：96T/48T

外消旋α-羥基布洛芬  rac α-Hydroxy Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MousemicroalbunminuriaELISAKIT小鼠微量白(ALB)規(guī)格：96T/48T

(R)-布洛芬  (R)-Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseMotilinELISAKit小鼠胃動(dòng)素(MTL)規(guī)格：96T/48T

(S)-布洛芬  (S)-Ibuprofen  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseNF-kBELISAKit小鼠NF-kB規(guī)格：96T/48T

依那普利  Enalapril  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseniicoxidesyhaseELISAKIT小鼠合成酶(NOS)規(guī)格：96T/48T

1,3-二芐基-5-氟尿嘧啶  1,3-Dibenzyl-5-fluorouracil  質(zhì)量規(guī)格：美國進(jìn)口 英文名稱MouseNN-T4ELISAKit小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)規(guī)格：96T/48T
Sitostenone  1058-61-3  中文名：豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O  度：96.0%  關(guān)鍵詞：  蘇里南苦木; 火炬松; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠氧化(OxLDL)ELISA試劑盒           

Sitagliptin phosphate  654671-78-0  中文名：無水磷酸西他列汀  分子式：C16H18F6N5O5P  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠牙本質(zhì)涎0蛋白   英文名稱：   Mouse Dein Sialophosphoprotein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DSP

Sitafloxacin  127254-12-0  中文名：西他沙星  分子式：C19H18ClF2N3O3  度：98.5%      小鼠DNA抗體   英文名稱：   Mouse Deoxyribonucleic Acid Aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DNA.Ab

Silodosin  160970-54-7  中文名：西洛多辛  分子式：C25H32F3N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠氧化酶   英文名稱：   Mouse Diamine Oxidase   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DAO

 中文名：枸櫞酸  分子式：C28H38N6O11S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠多巴胺受體D1   英文名稱：   Mouse Dopamine receptor D1   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DRD1
Daoy細(xì)胞Uzarigenin  466-09-1  中文名：  分子式：C23H34O4    Humanenkephalin,ENKELISA試劑盒人腦啡肽(ENK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Odoroside H  18810-25-8  中文名：  分子式：C30H46O8    組織PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Neridienone B  61671-56-5  中文名：  分子式：C21H28O4    HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀腺素抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Neritaloside  465-13-4  中文名：  分子式：C32H48O10    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Ophiopogonin D  945619-74-9  中文名：麥冬皂苷D  分子式：C44H70O16    Human thymus activation regulated chemokine (TAFA/CCL17) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒
注意事項(xiàng)：
Daoy細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太?。?/span>
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。