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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P64578
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-12
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P64578
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50次
純度 %
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒

50

BK-P64578

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,432。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sertaconazole  中文名:舍他康唑  分子式:C20H15Cl3N2OS 

豬細胞色素氧化酶(CC0ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5  度:98.0%

豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5 

豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Shikimic acid  138-59-0  中文名:莽草酸  分子式:C7H10O5  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  莽草; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

豬細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tenuifoliside A  139726-35-5  中文名:遠志蔗糖酯分子式:C31H38O17
CL-0405NCI-H716(結(jié)直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2雷特格韋質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRRaltegravir

羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細胞 Sars蛋白表達株,293001A細胞 NCI-H596 [H596](細胞)雷帕霉素/西羅莫司質(zhì)量規(guī)格:>98.0%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Rapamycin(Sirolimus)

肺鱗癌細胞;NCI-H520氯硝柳胺質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRNiclosamide

HAVCR1 Others Rat 大鼠 KIM1 / TIM1 / HAVCR1 細胞裂解液 (陽性對照) 氯硝柳胺(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品Niclosamide

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMY0911環(huán)丙沙星質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP32,BR,可用于細胞培養(yǎng)Ciprofloxacin
腎上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL佛司可林(標準品)Forskolin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

B16F10細胞,小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞 FRhK-4(恒河猴胚腎細胞) SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞;hFOB 1.19黃藤素(標準品)Palmatine質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

CCL17 Protein Human 重組 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白鹽酸西那卡塞;鹽酸甲狀旁腺激素Cinacalcet HCl,AMG073質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

SHG-44 (細胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細胞裂解液 (陽性對照) 黃藤素Palmatine質(zhì)量規(guī)格:≥97%,BR

;MRC-5鏈霉蛋白酶/鏈絲菌蛋白酶/鏈霉菌蛋白酶Pronase E質(zhì)量規(guī)格:BR4000u/mg,進分
Periplocoside N  中文名:  分子式:C27H44O6    雞β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Periplocoside M  中文名:北五加皮苷分子式:C34H52O9    雞球蛋白E(IgE)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Periplocoside F  中文名:  分子式:C63H104O23    雞球蛋白A(IgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Periplocogenin  中文名:  分子式:C28H42O6    中文名稱   方法   規(guī)格

Periplocin  中文名:杠柳毒苷  分子式:C36H56O13    人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
立克次氏體通用染料法熒光定量PCR試劑盒主要服務(wù):DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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