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產(chǎn)品簡稱：HRGEC細(xì)胞
中文名稱：人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：腎小球；內(nèi)皮細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號：E0818

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PSMAD2/3 Ab  4,5,6,7-Tetrahydrothieno [3,2,c]pyridine hydrochloride  中文名：  分子式：C7H10ClNS  度：98.0%

0酸化AKT蛋白   英文名稱：   phosphorylation AKT   英文縮寫：   p-AKT   規(guī)格：   48T/96T  3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide  中文名：3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物  分子式：C7H4O3S2  度：90.0%

0酸化AKT蛋白   英文名稱：   phosphorylation AKT   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   p-AKT  n-Octylbenzene  2189-60-8  中文名：  分子式：C14H22  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

（皮膚骨骼肌腸肌肉等難勻特殊樣品）   (the skin and skeletal muscle and other hard uniform special sample)  Xanthorin  中文名：  分子式：C16H12O6 

（半自動/手工）   A test box                 p-Anisoin  119-52-8  中文名：對茴香偶姻  分子式：C16H16O4
生長激素釋放因子-2  GHRP-2  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA檢測試劑盒Humanai-filaggrinaibody,AFAELISAKit 96T/48T

胰素樣肽-2（1-34)，人  GLP-2 (1-34) (human)  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 Rat heat shock protein 40,hSP-40 ELISA Kit

胰素（1-29），牛，人，豬  Glucagon (1 - 29), bovine,human, porcine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱RatFollistatinELISAKit大鼠卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

胰素（19-29），牛，人，豬  Glucagon (19 - 29), bovine,human, porcine  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 基質(zhì)膠體法人體胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒10

胰素樣肽Ⅰ（7-36）酰胺，人  Glucagon-Like Peptide I (7-36),amide, human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR ELISAKitCTX人細(xì)胞規(guī)格：48T/96T

激素釋放激素相關(guān)蛋白（1-13），人  Gn-RH Associated Peptide (GAP) (1-13), human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 ，英文名： PARC/CCL18 ELISA Kit

海沙瑞林  Hexarelin  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA檢測試劑盒Ratai-EndomysialAibodyIgA,EMAIgAELISAKit 96T/48T

組胺素5  Histatin 5  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 人白介素23(IL-23)試劑盒 Human Ierleukin 23,IL-23 ELISA Kit

惡性因子（1-34）酰胺，人  Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), amide, human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR 英文名稱MousetotalhemolyticcomplemeELISAKit小鼠總?cè)苎a(bǔ)體(CH50)規(guī)格：96T/48T

惡性因子（1-34）， 人  Hypercalcemia Malignancy Factor (1-34), human  質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR PDGF-A蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
DKK1 Others Human 人 DKK1 / Dkk-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 黃芪甲苷質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRAstragaloside IV

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B細(xì)胞;KMY0902那格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Nateglinide

KLRB1A Others Mouse 小鼠 NKR-P1A / Klrb1a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 帕米1酸二鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,五水合物Pamidronate Di

H125 人細(xì)胞帕米1酸二鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Pamidronate Di

DLD-1人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞 DLD-1 human colorectal cancer cell line 1640+10% FBS硫酸慶大霉素質(zhì)量規(guī)格：>590IU/MG,BRGentamicin sulfate
HRGEC細(xì)胞CD34 Others Human 人 CD34 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Glycyrrhizic acid

小鼠漿細(xì)胞瘤;MPC-11甘草酸單銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Glycyrrhizic acid ammonium salt

PTGDS Others Human 人 PTGDS / L-PGDS 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸單銨鹽質(zhì)量規(guī)格：UV>97%,無水物,BRGlycyrrhizic acid ammonium salt

人食管平滑肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL甘草酸二銨鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：UV≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Diammonium Glycyrrhizate

7WPS1細(xì)胞，人APP-PS1雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株 變異鏈球菌 兔間變表皮鱗株;VX2甘草酸二銨鹽質(zhì)量規(guī)格：UV≥97%,BRDiammonium Glycyrrhizate
注意事項(xiàng)：
HRGEC細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。