產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E0855 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 直腸腺癌 |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用,有效避免污染。
產(chǎn)品名稱 | HRC99細(xì)胞 |
單位 | 瓶 |
貨號(hào) | E0855 |
產(chǎn)品簡稱:HRC99細(xì)胞
中文名稱:人直腸腺癌細(xì)胞(中分化)
規(guī)格:瓶
種屬:人
來源:直腸腺癌
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
單位:
貨號(hào):E0855
細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng):
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下,DMSO對(duì)人體有害,故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時(shí)添加。
具體步驟:
HRC99細(xì)胞一. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
Iloperidone 中文名:伊潘立酮 分子式:C24H27FN2O4 豬肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA試劑盒
Ilaprazole 中文名:艾普拉唑 分子式:C19H18N4O2S 豬紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA試劑盒
Ikshusterol 3-O-glucoside 中文名: 分子式:C35H60O7 豬轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒
Hypocrellin A 中文名:竹紅菌甲素 分子式:C30H26O10 豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kBp65)ELISA試劑盒
Hydroxyprogesterone acetate 中文名:醋酸羥孕酮 分子式:C23H32O4 豬核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)ELISA試劑盒
香草酸 HPLC≥97% 100mg HumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit 人NOD樣受體(NLR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香草乙酮 HPLC≥98% 20mg HumanNon-PhosphorylatedIGFBP-1ELISAKit 人未0酸化類生長因子結(jié)合蛋白-1ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香豆素 HPLC≥98% 20mg humanNoradrenaline,NAELISAKit 人去甲(NA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香蜂草苷 HPLC≥98% 20mg HumanN-terminalpro-brainnaiureticpeptide,-proBNPELISAKIT 人N端前腦素(-proBNP)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香荊芥酚 HPLC≥98% 50mg Humanoctameranscriptionfactor2A,OTF2AELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香蘭素 HPLC≥98% 20mg Humanoctameranscriptionfactor2B,OTF2BELISAKit 人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香蒲新苷 HPLC≥98% 20mg humanpapillomavirusIgG,HPV-IgGELISAKit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香葉醇 HPLC≥98% 20mg Humanparaoxonase,PONELISAKit 人酶(PON)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香葉木素 HPLC≥98% 20mg Humanpeptidoglycan,PGELISAKit 人肽聚糖(PG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
香葉木素O葡萄糖苷 HPLC≥98% 20mg HumanPeptidylprolylcis/ansisomerase,PPIELISAKit 人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T 3-Quinuclidinone 3731-38-2 中文名:3-奎寧環(huán)酮 分子式:C7H11NO
綠膿桿菌(PA)核酸檢測試劑盒 48T 3-Oxo-4-aza-5-alpha-androstane-17β-carboxylic acid 中文名: 分子式:C19H29NO3 度:98.0%
鹿樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit 3-Benzalphthalide 575-61-1 中文名:3-亞芐基苯酞 分子式:C15H10O2
鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit 3-Aminopiperidine dihydrochloride 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2
鹿內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit 3-Aminopiperidine dihydrochloride 中文名: 分子式:C5H14Cl2N2 度:98.0%
HRC99細(xì)胞Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3 人鐵蛋白(FE)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 Human FE (Ferritin) ELISA Kit
Methenolone enanthate 303-42-4 中文名:美替諾龍庚酸酯 分子式:C27H42O3 人組織因子(TF)ELISA試劑盒
Methenolone acetate 434-05-9 中文名:美替諾龍醋酸酯 分子式:C22H32O3 人組織型纖維溶酶激活物(t-PA)ELISA試劑盒
Androst-2-en-17-one 963-75-7 中文名:5α-雄甾-2-烯-17-酮 分子式:C19H28O 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒
Epiandrosterone 481-29-8 中文名:表雄酮 分子式:C19H30O2 人組織相容性復(fù)合體Ⅰ類相關(guān)基因D(MICD)ELISA試劑盒
細(xì)胞計(jì)數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3