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上海帛科生物技術有限公司
   
     
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豬藍耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進口、國產(chǎn)
  • 貨號:BK-P63886
  • 價格: ¥3800/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-15
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進口、國產(chǎn)
品牌 帛科
貨號 BK-P63886
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
包裝規(guī)格 50T
純度 詳見說明書%
CAS編號
是否進口

本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

豬藍耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR)

50T

BK-P63886

實驗方法步驟:
方法
1
:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix
2mM 
4 μl     
引物110pM 
2 μl     
引物210pM 
2 μl     Taq
酶 (2U/μl 
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl 
1 μl     
ddH2O 50 μl 

PCR實驗步驟:
取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
兩相分離 每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2mllvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,1530℃孵育23分鐘。4℃12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%
③RNA
沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后1530℃孵育10分鐘后,于4℃12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA
清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA
干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1
、食品樣品:樣品的采集與預培養(yǎng)按照樣品的采集與預培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2
、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3
、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4
、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 6 10 倍稀釋度為例)
1.
注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2.
標記 6 個離心管,分別為 7,65,4,32。
3.
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.
7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5.
換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6.
換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.
重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl chlorogenate  中文名:綠原酸甲酯  分子式:C17H20O9 

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名:綠原酸甲酯  分子式:C17H20O9  度:98.0%  關鍵詞:  莽草酸; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Estradiol-3-benzoate-17-butyrate  中文名:雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯  分子式:C29H34O4 

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體1(VEGFR-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Methyl chlorogenate  29708-87-0  中文名:綠原酸甲酯  分子式:C17H20O9 

小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體1(mouse VEGF-R1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝     Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate  114772-38-2  中文名:  分子式:C15H13BrO2
TNFSF10 Protein Mouse 重組小鼠 TNFSF10 / AIL / APO-2L 蛋白 (aa 118-291, His 標簽)雙嘧達莫質(zhì)量規(guī)格:>98%,USPDipyridamole

肝間充質(zhì)干細胞()(HMSC-HE)(5×105) HGC-27細胞 Human他米巴羅汀質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%Tamibarotene

EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KM9402分子篩3A(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用Molecular sieves, 3 ?

齒根膜韌帶成纖維細胞(HPDLF)( 5×105 )分子篩3A(pellets,3-5 mm)質(zhì)量規(guī)格:pellets,3-5 mmMolecular sieves, 3 ?

CL-0406NCI-H838(非小細胞細胞)5×106cells/瓶×2分子篩3A(pellets,2-3 mm)質(zhì)量規(guī)格:pellets,2-3 mmMolecular sieves, 3 ?
RWPE-2(正常細胞) 5×106cells/瓶×2法莫替丁相關化合物BFamotidine Related Compound B質(zhì)量規(guī)格:美國進口

HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0369IR983F(大鼠*瘤細胞)5×106cells/瓶×2 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細胞;COS-1非那西丁-乙氧基-2-13CPhenacetin-ethoxy-2-13C質(zhì)量規(guī)格:美國進口

尿道上皮細胞RNAHUC miRNA5 μg非那西丁-乙氧基-1-13CPhenacetin-ethoxy-1-13C質(zhì)量規(guī)格:美國進口

FLT3LG Others Mouse 小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 細胞裂解液 (陽性對照) 氟西汀Fluoxetine質(zhì)量規(guī)格:美國進口

主動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL元鹽酸氟西汀Meta Fluoxetine 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
1,4-Bis[2-(4-methyl-5-phenyloxazolyl)]benzene  中文名:1,4-[2-(4-甲基-5-苯基惡唑基)]  分子式:C26H20N2O2    小鼠組織蛋白去乙酰化酶(HD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

1,4-Bis(5-phenyl-2-oxazolyl)benzene  中文名:1,4-(5-苯基-2-惡唑基)  分子式:C24H16N2O2    小鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene  中文名:1,4-(2-苯并惡唑基)  分子式:C24H14N2O2    小鼠組織纖溶酶原激活劑(mouse t-PA)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

1,4-Benzodioxane-6-carboxylic acid  中文名:1,4-苯并二氧六環(huán)-6-羧酸  分子式:C9H8O4    小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白(mouse ansferrin)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

1,3-Bis(4-aminophenoxy)benzene  中文名:1,3-(4-氨苯氧基)  分子式:C18H16N2O2    小鼠胸腺基質(zhì)細胞生成素(mouse TSLP)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進口分裝

實驗注意事項:
1
RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;
2
)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;
3
)客戶盡量不要提供DNARNA樣品。
4
)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCRquantitative real-time PCRqPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
豬藍耳病病毒通用型(PRRSV-U)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)主要服務:DNARNA*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術:引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

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