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產(chǎn)品簡稱：HEC-251細(xì)胞
中文名稱：人細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：；女性

培養(yǎng)基：EMEM

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0470

帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ，如疫苗，單克隆抗體或者制藥工業(yè)，也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用，有效避免污染。

細(xì)胞的凍存：
1.先將凍存管放入4℃冰箱，約40min。
2.接著置于-20℃冰箱，約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄，在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng)：
1.使用DMSO前，不需要進(jìn)行高壓滅菌，它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu)，以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下，DMSO對(duì)人體有害，故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃～-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久，低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi)，是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量，及時(shí)添加。

具體步驟：
HEC-251細(xì)胞一. 水的制備：
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈，不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：
1.溶解定容：將藥品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO40. 2g ）倒入盛有雙蒸水的燒杯中，玻璃棒攪動(dòng)，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml，搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶內(nèi)待消毒：將PBS倒入溶液瓶（大的吊針瓶）內(nèi)，蓋上膠帽，并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒：
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān)，在pH為8.0、溫度為37℃時(shí)，胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí)，應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間，以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks液。終止消化時(shí)，可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液濃度為0.25％，用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水（若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右）或PBS（D-hanks）液中。攪拌混勻，置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒：配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器（0.22微米微孔濾膜）抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。

細(xì)胞計(jì)數(shù)：
1.蓋好蓋玻片：取一套血球計(jì)數(shù)板，將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液：用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中，加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液（0.4％）或苯胺黑，活細(xì)胞不會(huì)被染色，加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板：將待測細(xì)胞懸液吹均勻，然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入，要保證蓋片下充滿懸液，注意蓋片下不要有氣泡，也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)：將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察，并移動(dòng)計(jì)數(shù)板，當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后，數(shù)出四角的四個(gè)大鉻（每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻）中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度：
（細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù)）/ml＝ （ 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明：公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1：1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為：
1.0mm（長）×1.0mm（寬）×0.1mm（高）＝0.1mm3 而 1ml＝1000mm3

Humanphospholamban,PLNELISAKit人受0蛋白(PLN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  12-Hydroxyjasmonic acid  140631-27-2  中文名：12-羥基酸  分子式：C12H18O4 

Humanphosphoinositide-specificphospholipaseC,PIPLCELISAKit人0酯酰肌醇特異性0酯酶C(PIPLC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11β-Hydroxy-2'-methyl-5'βH-pregna-1,4-dieno[17,16-d]oxazole-3,20-dione  中文名：  分子式：C23H29NO4 

humanphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISAKit人0酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11β,17α-Dihydroxy-6α-methylpregna-1,4-diene-3,20-dione  6870-94-6  中文名：  分子式：C22H30O4 

Humanphosphoglyceratemase2,PGAM2ELISAKit人0酸甘油酸變位酶2(PGAM2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11α-Hydroxyandrost-4-ene-3,17-dione  中文名：11α-羥基-雄甾-4-烯-3,17-二酮  分子式：C19H26O3 

HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  11-Hydroxyjasmonic acid  140447-14-9  中文名：  分子式：C12H18O4
戊硫醇（標(biāo)準(zhǔn)品）  n-Amyl mercaptan  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC, ≥99.5% (GC) 牛β羥(βOHB)ELISA檢測試劑盒BovineBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISAKit 96T/48T

Amberlite IR-120陽離子交換樹脂（鈉型）  AmberliteIR-120  質(zhì)量規(guī)格：鈉型 牛白介素2受體(IL-2R)ELISA檢測試劑盒BovineIerleukin-2receptor,IL-2RELISAkit 96T/48T

乙酸戊酯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Amyl acetate  質(zhì)量規(guī)格：for GC,≥99.5%(GC) 牛的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒Bovinerudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

苯乙酮（標(biāo)準(zhǔn)品）   Acetophenone  質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC) 牛分泌型球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒BovinesecretoryimmunoglobulinA,sIgAELISAKit 96T/48T

偶氮苯（標(biāo)準(zhǔn)品）  Azobenzene  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛固酮(ALD)試劑盒 Bovine aldosterone,ALD ELISA kit

酸洗石棉  Asbestos acid washed  質(zhì)量規(guī)格：AR 牛過氧化物酶體增殖因子活化受體γ(PPARG)試劑盒 Bovine peroxisome proliferator-activated receptor gamma,PPARG ELISA kit

苊（標(biāo)準(zhǔn)品）  Acenaphthene  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC) 牛(LPO)試劑盒 Bovine lipid peroxide,LPO ELISA kit

鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3）  Aluminum solution  質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3 牛核心蛋白聚糖(DCN)試劑盒 Bovine Decorin,DCN ELISA kit

鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（100μg/mL,基體:5%HCl）  Aluminum solution  質(zhì)量規(guī)格：100μg/mL,基體:5%HCl 牛壞死因子α(TNF-α)試劑盒 Bovine Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA kit

(+/-)-兒茶精（標(biāo)準(zhǔn)品）  (±)-Catechin hydrate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 牛環(huán)0酸鳥苷(cGMP)試劑盒 Bovine cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
羥脯酸（Hyp）測定試劑盒（堿水解法）（測動(dòng)物血清、組織、尿液）                    Rhein  478-43-3  中文名：大黃酸  分子式：C15H8O6 

強(qiáng)啡肽   英文名稱：   Human Dynorphin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DYN  3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  中文名：  分子式：C28H46O2 

酸性0酶（PACP）檢測   Glamine syhetase (GS) detection                 Polypodine B  18069-14-2  中文名：水龍骨甾酮B  分子式：C27H44O8 

素 E1(PGE1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Peri acid  82-75-7  中文名：周位酸  分子式：C10H9NO3S 

漆酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣              4,9-Dihydroxy-α-lapachone  中文名：  分子式：C15H14O5
HEC-251細(xì)胞5-Azacytidine  320-67-2  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5    鹿樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)ELISAKit  

Bathophenanthroline  1662-01-7  中文名：紅菲繞啉  分子式：C24H16N2    鹿內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISAKit  

2-Amino-6-chloropurine  10310-21-1  中文名：2-氨基-6-氯嘌呤  分子式：C5H4ClN5    鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISAKit              

Acetophenone tosylhydrazone  4545-21-5  中文名：苯乙酮對(duì)甲苯磺?；?/span>  分子式：C15H16N2O2S    山梨醇含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Amino-4-chlorobenzothiazole  19952-47-7  中文名：2-氨基-4-氯苯并噻唑  分子式：C7H5ClN2S    山梨醇脫氫酶測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣