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實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶(hù)盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱(chēng)和ID號(hào)；
3）客戶(hù)盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專(zhuān)用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Chlorhexidine acetate  中文名：醋酸氯己定  分子式：C26H38Cl2N10O4 

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白elisa試劑盒   小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白試劑盒、小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Mannitol  中文名：甘露醇  分子式：C6H14O6 

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(mouse ECP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Diclofenac   中文名：雙氯芬酸鈉  分子式：C14H10Cl2NNaO2 

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Ergosterol peroxide glucoside  140447-22-9  中文名：過(guò)氧化麥角甾醇葡萄糖苷  分子式：C34H54O8  度：85.0%  關(guān)鍵詞：  麥角甾烷; 甾苷; 對(duì)照品; 標(biāo)準(zhǔn)品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

小鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白   英文名稱(chēng)：   Mouse Eosinophil Cationic Protein   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   ECP  Dabigatran etexilate  中文名：  分子式：C34H41N7O5  度：98.0%
SFTPD Others Mouse 小鼠 SFTPD 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 異鳥(niǎo)苷水合物Isoguanosine Hydrate質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

狗腎惡性癥細(xì)胞;DH823,5-O-(1,1,3,3-四異丙基-1,3-二硅氧烷)腺苷3',5'-O-(1,1,3,3-Tetraisopropyl- 1,3-Disloxanediyl)Adenosine  質(zhì)量規(guī)格：美國(guó)進(jìn)口

FGFR2 Others Human  FGFR2 / CD332 (aa 400-821) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 21-乙酰氧基孕1醇酮21-Acetoxypregnenolone質(zhì)量規(guī)格：BR,美國(guó)進(jìn)口

CL-0113HO-8910(細(xì)胞)5×106cells/瓶×2珊瑚菜內(nèi)酯，珊瑚菜素(標(biāo)準(zhǔn)品)phelloptorin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

THP-1單核細(xì)胞 低分化腺癌細(xì)胞,HCT-116細(xì)胞 SK-MES-1(肺鱗癌細(xì)胞)鞣花酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Ellagic acid質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
TACSTD2 Others Human  OP2 / TACSTD2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 漆黃素Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥95%,BR

山羊皮膚成纖維樣細(xì)胞;DG-S1漆黃素（標(biāo)準(zhǔn)品）Fisetin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

PDCD1LG2 Others Mouse 小鼠 B7-DC / PD-L2 / CD273 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 奇任醇(標(biāo)準(zhǔn)品)Kirenol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

HuTu-80 十二指腸腺癌細(xì)胞千層紙素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Oroxylin A質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品

WERI-Rb-1視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)胞 WERI-Rb-1 human retinal glial cell RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS千金子二萜醇二乙酰苯甲酰酯（標(biāo)準(zhǔn)品）5,15-Diacetyl-3-benzoyllathyrol質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品
Rengyol  93675-85-5  中文名：連翹環(huán)己醇  分子式：C8H16O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  連翹; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠促甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroid Stimulating Hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   TSH

Rengynic acid  517883-38-4  中文名：  分子式：C8H14O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  千里光; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠甲狀腺素   英文名稱(chēng)：   Mouse Thyroxine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   T4

Rebeprazole   117976-90-6  中文名：雷貝拉唑鈉  分子式：C18H20N3NaO3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體   英文名稱(chēng)：   Mouse TNF-related apoptosis inducing ligand   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   AIL

Rasagiline mesylate  161735-79-1  中文名：甲磺酸雷沙吉蘭  分子式：3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠血清總補(bǔ)體(CH50)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ranolazine di  95635-56-6  中文名：鹽酸雷諾嗪  分子式：C24H35Cl2N3O4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

鸚鵡熱衣原體（CP）PCR檢測(cè)試劑盒（熒光-PCR法）本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。