產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | BK-P64440 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 1 mL |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號(hào) | |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
通用型蛋白酶抑制劑混合液,100X |
1 mL |
BK-P64440 |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
公司產(chǎn)品僅用于科研使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR(quantitative
real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括*定量和相對(duì)定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
心肌鈣蛋白 I(cTnI) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Antipyrine 中文名:安替比林 分子式:C11H12N2O
心肌鈣蛋白 (c) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Nicorandil 中文名:尼可地爾 分子式:C8H9N3O4 度:98.0%
蟹特定基因序列(Cytb)*試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Aspartame 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5 度:98.0%
蟹特定基因序列(Cytb)*試劑盒 48T Aspartame 中文名:阿司帕坦 分子式:C14H18N2O5
小鼠組織因子抑制物(mouse TFPI) 作用: ELISA 規(guī)格:
48T/96T 進(jìn)口分裝 Methenolone
enanthate 303-42-4 中文名:美替諾龍庚酸酯 分子式:C27H42O3
Burkkit瘤細(xì)胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mLPS48PS 48質(zhì)量規(guī)格:>99%,PDK1 activator
MMQ 小鼠細(xì)胞阿巴卡韋5'-β-D-葡萄糖苷酸Abacavir 5'-β-D-Glucuronide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
FETUB Others Human Fetuin-B / FETUB 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
非小細(xì)胞;NCI-H19751-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
SLAMF6 Others Human SLAMF6 / Ly108 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A鹽酸阿比朵爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Arbidol HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
C6, 大鼠腦細(xì)胞阿加曲班Argatroban質(zhì)量規(guī)格:>99%,超,細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)
癌細(xì)胞;MCF 7B 大鼠肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL阿加曲班(標(biāo)準(zhǔn)品)Argatroban質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
雪旺氏細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)醋酸精氨酸加壓素Argipressin Acetate質(zhì)量規(guī)格:度98%
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 阿替洛爾Atenolol質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,USPgrade
5,6,7,7a-Tetrahydrothieno[3,2-c]pyridine-2(4H)-one 中文名: 分子式:C7H10ClNOS 英文名稱: Mouse NO niic oxide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NO
5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 中文名: 分子式:C19H18N2O3S 小鼠核轉(zhuǎn)錄因子 英文名稱: Nuclear anscription Factor NF-KB 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NF-κB
5-(4-((3-chloro-4-((3-fluorobenzyl)oxy)phenyl)amino)quinazolin-6-yl)furan-2-carbaldehyde 中文名: 分子式:C26H17ClFN3O3 小鼠核因子-κB亞基ρ65親和肽 英文名稱: Nuclear anscription Factor NF-Κb ρ65 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NF-Κb ρ65
5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate 中文名: 分子式:C22H25N3O2 小鼠神經(jīng)生長因子 英文名稱: nerve growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NGF
5通用型蛋白酶抑制劑混合液,100X-(1-Piperazinyl)benzofuran-2-carboxamide 中文名: 分子式:C13H15N3O2 氧化酶(XOD)測試盒(比色法)