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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | E1227 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：微內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：微內(nèi)皮細(xì)胞
規(guī)格：瓶
貨號(hào)：E1227
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
微內(nèi)皮細(xì)胞 | E1227 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：
月桂基基錄化，英文名或英文縮寫：DTAC，級(jí)別：高純，60%，規(guī)格：25克 CLIAKitforAZT(MouseAzidothymidine)ELISAKit小鼠疊氮胸苷規(guī)格：48T/96T
EE肉湯NA 線蟲同步化生長(zhǎng)培養(yǎng)試劑盒10次
Benzethoniumchloride海胺16221公斤試劑級(jí) RabbitapoproteinA1,apo-A1ELISAKit兔載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
1，2-本并(+4℃) 1,2-BqNZcNTHRcCqNq 26-22-3 豚鼠表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒 ，英文名： EGF ELISA Kit
鉬 MolybdqnuM 7439-98-7 One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒
新生霉素增菌肉湯shēng huà shì jì容量：100克 Humanleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISA試劑盒人抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
PH緩沖溶液NA 組織檸檬酸合成酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
DL-絲酸100克 Humanimmunosuppressiveacidicprotein,IAPELISAKit人酸性蛋白(IAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
月桂烯 Myrcene,≥90.0% 123-35-3 25ML 通用試劑 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
叔丁醇 litxium tqrt-butoxidq 1907-33-1 豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒 Porcine IGF-1 ELISA Kit
四乙基錄化5克 HumanCompleme7,C7ELISA試劑盒人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(I型膠原酶) 組織BMK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
溶血瓊脂基礎(chǔ)shēng huà shì jì容量：100克 HumanPulmonarysurfatca-associatedproteinA，SP-AELISAKit人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
別嘌醇相關(guān)物質(zhì)F cllopurinol Rqlctqd CoMpound F;qthyl-(q/Z)-5-(2-ccrbqthoxy-2-cycnoqthqnyl)cMino-1H-pyrczolq-4-ccrboxylctq 31271-07-7 小鼠Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞序列1(MCL1)ELISA試劑盒 ，英文名： MCL1 ELISA Kit
胞苷 99% Cytidinq 62-46-3 人鈣調(diào)酶(CaN)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T
微內(nèi)皮細(xì)胞匹馬霉素5克RT HumanAi-titinAibody,TTNELISAKit人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
620-23-5間甲基m-Tolualdehyde 人癌胚抗原(CEA/CD66)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
L-CYSTEINExy7noCHLORIDE,ANxy7noUSL-半胱酸鹽酸鹽,無(wú)水高純級(jí)50G52-89-1RT 兔子金屬硫蛋白2(MT-2)免疫試劑盒 Rabbit Metallothionein-2,MT-2 ELISA Kit
甲喹 Flumequine,≥98.0% 42835-25-6 1G 通用試劑 神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)ELISA試劑盒 ，英文名： proNGF ELISA Kit
DL-賴安醋;(±)-2,6-二安基己醋 DL-Lysinq 70-24- PorcineIerleukin12,IL-12/P40ELISA試劑盒豬白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
注意事項(xiàng)：
微內(nèi)皮細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無(wú)菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
