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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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腎小管上皮細(xì)胞
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國產(chǎn)
  • 貨號:E1255
  • 價格: ¥1830/株
  • 發(fā)布日期: 2020-10-19
  • 更新日期: 2024-11-22
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 E1255
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源
細(xì)胞形態(tài) 詳見說明書
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài)
物種來源
包裝規(guī)格
純度 詳見說明書%
是否進(jìn)口

產(chǎn)品簡稱:腎小管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:腎小管上皮細(xì)胞

規(guī)格:瓶

貨號:E1255

產(chǎn)品名稱

腎小管上皮細(xì)胞

單位

貨號

E1255

帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實驗室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實用,有效避免污染。

細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4冰箱,約40min。
2.
接著置于-20冰箱,約30-60min。
3.
置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.
置于液氮罐中長期保存。
5
產(chǎn)品僅用于科研同時做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項:
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下,DMSO對人體有害,故在配制時*戴上手套操作。
2.
不宜將凍存細(xì)胞放置在0-60這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是危險溫區(qū)。
3.
注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時添加。

具體步驟:
腎小管上皮細(xì)胞. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制)
1.
溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2gNa2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.
移入溶液瓶內(nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補充蒸發(fā)掉的水份。
. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH8.0、溫度為37時,胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+BSS,如:D-Hanks液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。
1.
稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH7.2左右)或PBSD-hanks)液中。攪拌混勻,置于4內(nèi)過夜。
2.
用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20保存以備使用。

細(xì)胞計數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計數(shù)槽上。
2.
制備計數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.
將細(xì)胞懸液滴入計數(shù)板:將待測細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.
統(tǒng)計四個大格的細(xì)胞數(shù):將血球計數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動計數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個大鉻(每個大格含有16個中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.
計算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml 四個大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因為計數(shù)了4個大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因為細(xì)胞懸液于染液是11稀釋。
公式中乘以104因為計數(shù)板中每一個大格的體積為:
1.0mm
(長)×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 1ml1000mm3

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