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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒熒光法
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:國(guó)產(chǎn)
  • 型號(hào):100管/96樣
  • 貨號(hào):BK-S01410
  • 發(fā)布日期: 2020-10-19
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 國(guó)產(chǎn)
品牌 帛科
貨號(hào) BK-S01410
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
英文名稱
包裝規(guī)格 100管/96樣
純度 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)%
CAS編號(hào)
別名 線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒
分子式
是否進(jìn)口

商品介紹:

測(cè)定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過(guò)氧化氫、及其下游產(chǎn)物過(guò)氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來(lái)自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長(zhǎng)增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過(guò)程有關(guān)。

正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過(guò)多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。

因此,通過(guò)檢測(cè)活性氧的變化來(lái)判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。

測(cè)定原理:

熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過(guò)線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無(wú)熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。

需自備的儀器和用品:

多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。

基本信息:

產(chǎn)品名稱

檢測(cè)方法

規(guī)格

貨號(hào)

線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒熒光法

熒光法

100管/96樣

BK-S01410

特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致公認(rèn)是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。產(chǎn)品僅用于科研
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以 更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。

操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
人CD30分子elisa試劑盒   人CD30分子試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人CD30分子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人CD30分子試劑盒、人CD30分子elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。     Schleicheol 1  256445-66-6  中文名:  分子式:C30H52O2

人CD14分子elisa試劑盒   人CD14分子試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   人CD14分子試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人CD14分子試劑盒、人CD14分子elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。     Testosterone benzoate  2088-71-3  中文名:17-安息香酸雄烯醇酮  分子式:C26H32O3

人B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Chloromethyl-3-methyl-4-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyridine   中文名:  分子式:C9H10Cl2F3NO  度:98.0%

人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Aminofluorene  153-78-6  中文名:2-氨基芴  分子式:C13H11N

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式:C5H12O4
兔子α2抗纖溶酶(α2-AP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              5,6-Dihydro-6-methyl-4H-thieno[2,3-b]thiopyran-4-one  中文名:  分子式:C8H8OS2

兔子TH糖蛋白(THP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminopenicillanic acid  551-16-6  中文名:6-氨基青霉烷酸  分子式:C8H12N2O3S

兔子S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  6-Aminonicotinic acid  中文名:6-氨基煙酸  分子式:C6H6N2O2  度:98.0%

兔子S100蛋白(S-100)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  6-Aminoindole  5318-27-4  中文名:6-氨基吲哚  分子式:C8H8N2

兔子S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           6-Aminonicotinic acid  中文名:6-氨基煙酸  分子式:C6H6N2O2
9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene  107934-60-1  中文名:9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴  分子式:C27H24N2 奈瑟菌通用型(NM-U)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?   48T

4-Benzoyl-3-methyl-1-phenyl-5-pyrazolone  4551-69-3  中文名:4-苯甲?;?3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮  分子式:C17H14N2O2 奈瑟菌通用型(NM-U)試劑盒   48T

5-Benzyloxyindole  1215-59-4  中文名:5-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO    噬酸性粒細(xì)胞趨化因子 -2(Eotaxin-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Benzyl N-carbobenzoxy-L-aspartate  3479-47-8  中文名:N-芐氧羰基-L-天冬氨酸-4-芐脂  分子式:C19H19NO6    (EPO)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Benzoyloxy-2-azetidinone  28562-58-5  中文名:4-苯甲酰氧基-2-氮雜環(huán)丁酮  分子式:C10H9NO3    受體 ( EPO Receipter)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒熒光法Benzofuroxan  480-96-6  中文名:苯并呋咱  分子式:C6H4N2O2    山羊壞死因子αelisa試劑盒   山羊壞死因子α試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   山羊壞死因子α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊壞死因子α試劑盒、山羊壞死因子α elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。

(2-Benzothiazolylthio)acetic acid  6295-57-4  中文名:2-(苯并噻唑基硫代)乙酸  分子式:C9H7NO2S2    山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽elisa試劑盒   山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽試劑盒、山羊生長(zhǎng)激素釋放多肽elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。

Anthraquinone-1,5-disulfonic acid di salt  853-35-0  中文名:蒽醌-1,5-二磺酸二鈉鹽  分子式:C14H6Na2O8S2    山羊白介素4elisa試劑盒   山羊白介素4試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   山羊白介素4試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素4試劑盒、山羊白介素4 elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。

2-(Morpholinodithio)benzothiazole  95-32-9  中文名:2-(4-嗎啉基二硫代)苯并噻唑  分子式:C11H12N2OS3    山羊白介素10elisa試劑盒   山羊白介素10試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   山羊白介素10試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:山羊白介素10試劑盒、山羊白介素10 elisa試劑盒   保存條件:2-8℃   保質(zhì)期:6個(gè)月。

(1S,2R)-1-Amino-2-indanol  126456-43-7  中文名:(1S,2R)-1-氨基-2-茚醇  分子式:C9H11NO    山羊壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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