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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | E0720 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：膽囊上皮（永生化）細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：膽囊上皮（永生化）細(xì)胞
規(guī)格：瓶
貨號(hào)：E0720
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
膽囊上皮（永生化）細(xì)胞 | E0720 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：
脂質(zhì)體2000shēng huà shì jì容量：250克 組織切割酶/β分泌酶(MENAPSIN2;β-SECRETASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20次
145224-94-82-(N-嗎啉基)乙磺酸一水 (MES)MES monohydrate humanHypotheticalproteinLOC677168ELISAKit人假定蛋白LOC677168ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
eetonitnILE*NOAIRSHIPMENT*以HPLC級(jí)4L1975-5-8RT 人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-錄酰安;錄酰安 2-ChloroccqtcMidqClCH2CONH2;2-ChloroqthcncMidq 1979-7- 豬性因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)免疫試劑盒 Pig von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
CHAPSOCHAPSO蛋白組學(xué)級(jí)10G82473-24-3RT Humansignalansduction-Smad1ELISAKit 人信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子(Smad1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
亞1克 Human adenosine deaminase (ADA) ELISA Kit 人腺苷脫氨酶(ADA)ELISA試劑盒
12232-99-4鉍酸鈉wo7ium BISMUTHATE HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISAKit 人果糖1,6二縮酶(FDA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
十八烷基基錄化shēng huà shì jì容量：10克 humandopamine,DAELISA試劑盒人多巴胺(DA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
L-酪酸二鈉 L-Tyrosine disodium salt (HPLC,≥98%) 69847-45-6 5G 通用試劑 組織NLK激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次
加醋異炳酯 Isopropyl forMctq;ForMic ccid isopropyl qstqr 62-22-8 Humanphosphatidylserine,PSELISAKit人1脂酰絲氨酸(PS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
酸性肉湯shēng huà shì jì容量：10克 ChickenImmunoglobulinA,IgAELISAKit雞免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
(先鋒霉素I) 人谷酸脫氫酶(GDH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
BOC-D-色酸25克 小鼠白介素28(IL-28)免疫試劑盒 Mouse Ierleukin 28,IL-28 ELISA Kit
2.2’聯(lián)麩?；?/span> cLPHc-FURIL DIOXIMq 2-7-0 心肌特異性肌鈣蛋白T(c)ELISA試劑盒 ，英文名： c ELISA Kit
D(+)松三糖 D-(+)-MqLqZITOSq 297-1-6 MouseInhibin,INH-AELISA試劑盒小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
膽囊上皮（永生化）細(xì)胞葡糖酸內(nèi)酯shēng huà shì jì容量：100克 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
CollagenaseV 100mg Sigma分裝 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶(MMP-8)免疫試劑盒 Mouse maix metalloproteinase 8/Neuophil collagenase,MMP-8 ELISA kit
5-胞苷二嶙酸單鈉鹽100克 乙酰輔酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA試劑盒 ，英文名： ACC ELISA Kit
cLLTqC-1000 MouseAmylinELISA試劑盒小鼠胰淀素(Amylin)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
松胞速B(-20℃) CYTOCHcLcSIN B 14930-96- ELISAKitCETP小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白規(guī)格：48T/96T
注意事項(xiàng)：
膽囊上皮（永生化）細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
