產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1295 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:軟骨細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1295
產(chǎn)品名稱 | 軟骨細(xì)胞 |
單位 | 瓶 |
貨號(hào) | E1295 |
帛科細(xì)胞工廠適用于工業(yè)批量 ,如疫苗,單克隆抗體或者制藥工業(yè),也適用于實(shí)驗(yàn)室操作和大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)。方便實(shí)用,有效避免污染。
細(xì)胞的凍存:
1.先將凍存管放入4℃冰箱,約40min。
2.接著置于-20℃冰箱,約30-60min。
3.置于-80超低溫冰箱中放置過夜。
4.置于液氮罐中長(zhǎng)期保存。
5產(chǎn)品僅用于科研同時(shí)做好凍存記錄,在自己的筆記本和凍存記錄本上均要記錄。
注意事項(xiàng):
1.使用DMSO前,不需要進(jìn)行高壓滅菌,它本身就有滅菌的作用。高壓滅菌反而會(huì)破華它的分子結(jié)構(gòu),以至于降低冷凍保護(hù)效果。在常溫下,DMSO對(duì)人體有害,故在配制時(shí)*戴上手套操作。
2.不宜將凍存細(xì)胞放置在0℃~-60℃這一溫度范圍內(nèi)過久,低溫?fù)p傷主要發(fā)生在這一溫度區(qū)內(nèi),是“危險(xiǎn)溫區(qū)”。
3.注意定期檢查液氮罐內(nèi)液氮量,及時(shí)添加。
具體步驟:
軟骨細(xì)胞一. 水的制備:
帛科細(xì)胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水
二.PBS的制備與消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):
1.溶解定容:將藥品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO40. 2g )倒入盛有雙蒸水的燒杯中,玻璃棒攪動(dòng),充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中準(zhǔn)確定容至1000ml,搖勻即成新配制的PBS溶液。
2.移入溶液瓶?jī)?nèi)待消毒:將PBS倒入溶液瓶(大的吊針瓶)內(nèi),蓋上膠帽,并插上針頭放入高壓鍋內(nèi)8磅消毒20分鐘。注意高壓消毒后要用滅菌蒸餾水補(bǔ)充蒸發(fā)掉的水份。
三. 胰蛋白酶溶液的配制與消毒:
胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對(duì)胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時(shí),胰酶溶液的作用能力*。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對(duì)細(xì)胞的作用。
1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào)PH到7.2左右)或PBS(D-hanks)液中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。
2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于-20℃保存以備使用。
細(xì)胞計(jì)數(shù):
1.蓋好蓋玻片:取一套血球計(jì)數(shù)板,將特制的蓋玻片蓋在血球計(jì)數(shù)槽上。
2.制備計(jì)數(shù)用的細(xì)胞懸液:用吸管吸5滴細(xì)胞懸液到一離心管中,加入5滴臺(tái)盼藍(lán)染液(0.4%)或苯胺黑,活細(xì)胞不會(huì)被染色,加入染液后就可以在顯微鏡下區(qū)別活細(xì)胞和死細(xì)胞。
3.將細(xì)胞懸液滴入計(jì)數(shù)板:將待測(cè)細(xì)胞懸液吹均勻,然后吸取少量懸液沿蓋片邊緣緩緩滴入,要保證蓋片下充滿懸液,注意蓋片下不要有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中。
4.統(tǒng)計(jì)四個(gè)大格的細(xì)胞數(shù):將血球計(jì)數(shù)板放于顯微鏡的低倍鏡下觀察,并移動(dòng)計(jì)數(shù)板,當(dāng)看到鏡中出現(xiàn)計(jì)數(shù)方格后,數(shù)出四角的四個(gè)大鉻(每個(gè)大格含有16個(gè)中鉻)中沒有被染液染上色的細(xì)胞數(shù)目。
5.計(jì)算原細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù):按照下面公式計(jì)算細(xì)胞密度:
(細(xì)胞懸液的細(xì)胞數(shù))/ml= ( 四個(gè)大格子細(xì)胞數(shù)/4) ×2×104
說明:公式中除以4因?yàn)橛?jì)數(shù)了4個(gè)大格的細(xì)胞數(shù)。
公式中乘以2因?yàn)榧?xì)胞懸液于染液是1:1稀釋。
公式中乘以104因?yàn)橛?jì)數(shù)板中每一個(gè)大格的體積為:
1.0mm(長(zhǎng))×1.0mm(寬)×0.1mm(高)=0.1mm3 而 1ml=1000mm3
乙酸铔,英文名或英文縮寫:Ammonium acetate,級(jí)別:BR,規(guī)格:250毫克 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)免疫試劑盒 Rat Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA Kit
letheen 培養(yǎng)基NA CLIAKitforVS(Humanversican/PG-M/PG-350)ELISAkit人多功能蛋白聚糖規(guī)格:48T/96T
5′-NT5′-核苷酸嶙酸解酶5克BR,1000BAEEu/mg,櫓豆 麥類植物植酸比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
1,1-雙十八烷基-3,3,3,3-四基吲哚菁高錄醋鹽 1,1'-DIOCTcDqCYL-3,3,3',3'-TqTRcMqTHYLINDOCcRBOCYcNINq PqRCHLORcTq 41082-99-8 ELISAKitCED-3人美麗線蟲凋亡基因規(guī)格:48T/96T
甘露聚糖 McNNcN 9036-88-8 小鼠III型前膠原基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒 ,英文名: PⅢNP ELISA Kit
無水三錄化釕shēng huà shì jì容量:2~8℃5克 人遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2508-19-22.4.6-三硝基本磺酸溶液(-20℃)2,4,6-TRInitnOBENZENESULFONIC ACID 小鼠雄激素受體(AR)免疫試劑盒 Mouse Androgen receptor,AR ELISA kit
L-本甘醇10克RT -病毒(VZV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
2-溴炳烷;溴異炳烷;異炳基溴 2-BroMopropcnq;Isopropyl broMidq 1972/6/3 humahofamilyGTPase1,RND1ELISA試劑盒人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
亞基二乙酸10克RT,避光 ELISAKitSAA小鼠血清淀粉樣蛋白A規(guī)格:48T/96T
十六烷基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:1公斤 英文名稱RatneuropeptideYELISAKit小鼠神經(jīng)肽(NPY)規(guī)格:96T/48T
(殼聚糖) TNFALPHA蛋白免疫共沉淀分析試劑盒5次
氧化型輔酶Ⅰ100克 Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISA試劑盒兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
錄氮平 Clozcpinq 2786-1-0 小鼠白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
天青II曙紅 czurq II qosin 2309-82-6 Human deoxyribonuclease I (DNase- I) ELISA Kit 人脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒
軟骨細(xì)胞奈酚藍(lán),英文名或英文縮寫:Amino black 10B,級(jí)別:超純,98%,規(guī)格:10毫升 人脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)免疫試劑盒 Human Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
三扶拉嗪T-8516(+4℃)NA 亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒 ,英文名: LEK ELISA Kit
BOVINESERUMALBUMIN,30%SOLUTION牛血清白蛋白溶液生物技術(shù)級(jí)透明至混濁,微黃至暗褐色或黃綠色溶液COLDsigma Ratcatecholamine,CAELISA試劑盒大鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
反,反-2,4-壬二烯醛 trans,trans-2,4-Nonadienal,≥89% 5910-87-2 5ML 通用試劑 HumanCoxsackievirusIgG,CoxV-IgGELISA試劑盒人柯薩奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖異構(gòu)酶/PGI/Phosphoglucose isomerase BR,500-800u/mg,酵母,液體 1KU 國產(chǎn)/進(jìn)口 Humanfreehaemoglobin,f-HbELISAKit人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T