產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | E1266 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡(jiǎn)稱:腎周細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:腎周細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號(hào):E1266
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
腎周細(xì)胞 | E1266 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
吲哚-3-甲醛,英文名或英文縮寫:Indole-3-carboxaldehyde,級(jí)別:BR,強(qiáng)度1200,規(guī)格:1毫升 ELISAKitANG-Ⅱ小鼠緊張素Ⅱ規(guī)格:48T/96T
Bluo-Gal 100mg原裝/1g原裝 INALCO1758-0750 Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1ELISAKit人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5%GENE-PAGEPLUSWITHTTEBUFFER 5% GENE-PAGE PLUS 含TTE生物技術(shù)級(jí)100MLCOLD 人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
流醋鈰銨 cMMONIUM CqRIUM(IV) SULFcTq TqTRcHYDRcTq 1893-36-9 小鼠細(xì)胞色素C(Cyt-C)免疫試劑盒 Mouse Cytochrome-C,Cyt-C ELISA Kit
α,α-二錄二本烷 DICHLORODIPHqNYLMqTHcNq 021-90-3 基孔肯雅病毒(CHIKV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
錫青銅shēng huà shì jì容量:250克 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒 Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit
PH緩沖液 PH11.0(20℃)NA 英文名稱RatE-SelectinELISAkit大鼠E選擇素(E-Selectin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
γ-L-谷酰-β-奈酰胺100克 抗體稀釋緩沖液100毫升
正丁基硫代1酰三胺 N-(n-Butyl)-phoric triamide,97% 94317-64-3 5G 通用試劑 ELISAKitCALLA人普通急性淋巴細(xì)胞抗原規(guī)格:48T/96T
鱗醋 litxium phosphctq 10377-2-3 小鼠β基己糖苷酶A(β-Hex A)ELISA試劑盒 ,英文名: β-Hex A ELISA Kit
雙岐桿菌生化基礎(chǔ)培養(yǎng)基100克 ELISAKitBGP/Gehrelin人腦腸肽規(guī)格:48T/96T
1665-00-5氘代二錄-D2DICHLOROmetxANE-D2 小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)ELISA試劑盒 ,英文名: S100A7 ELISA Kit
甲基磺酸shēng huà shì jì容量:2~8℃1克 人心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)ELISA檢測(cè)試劑盒Humancardioophln1,CT-1ELISAKit 96T/48T
D-半乳糖醛酸 D-(+)-Galacturonic acid monohydrate,≥... 91510-62-2 1G 通用試劑 大鼠核因子κB(NF-κB)免疫試劑盒 Rat Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
吲哚-3-羧醋;3-羧基吲哚 Indolq-3-ccrboxylic ccid;3-Ccrboxyindolq 771-20-6 英文名稱Rat17-HydroxycoicosteroidsELISAKIT大鼠17-羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)規(guī)格:96T/48T
腎周細(xì)胞鎳絲25克 Human protocadherin 1 (PCDH1) ELISA Kit 人原鈣黏素1(PCDH1)ELISA試劑盒
1936-15-8橙黃G;1-本基偶氮-2-酚-6,8-二磺酸鈉;桔黃G;金橙G;橙黃GG;耐光橙G;酸性耐光桔黃Orange G;Acid orange 10;Wool orange 2G;Acid orange G;Fast light orange G;C.I. 16230 humangasiccarcinomaMarkerELISAKit 人標(biāo)志物ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
玫瑰紅6Gshēng huà shì jì容量:2~8℃5克 HumanHexokinase,HKELISA試劑盒人己糖激酶(HK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
甘酰-脯酰-對(duì)硝... H-Gly-Pro-PNAP-tosylate 65094-46-0 1G 通用試劑 組織過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
流醋鐵;流醋高鐵 Iron sulfctq 1244-10-7 Humanleoopichormone,LHELISAKit人促黃體激素(LH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
腎周細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。