產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | E1324 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | |
細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | |
物種來源 | |
包裝規(guī)格 | 瓶 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱:淋巴管成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品名稱:淋巴管成纖維細(xì)胞
規(guī)格:瓶
貨號:E1324
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
淋巴管成纖維細(xì)胞 | E1324 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇:從培養(yǎng)量大小來講,從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等,更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等,一般都經(jīng)過表面改性處理,適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用(如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等),75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用(一般性的傳代,保存細(xì)胞,為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等),25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng),還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng):
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%(過量不足,過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳,1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng),一般1:3至1:5細(xì)胞一代,即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間,非細(xì)胞有絲分裂次數(shù))時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶(注意:消化液的量以蓋住細(xì)胞*,*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞:倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞,若胞質(zhì)回縮,細(xì)胞之間不再連接成片,表明此時(shí)細(xì)胞消化適度)進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉完全培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入lml凍存液(90%胎牛血清,10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整,凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng),另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì),如蔗糖,白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞),放入凍存管內(nèi)(管內(nèi)有異丙醇,以保證溫度降低的速度),立即放入4oC冰箱中凍存30min,然后放入-20oC冰箱中凍存30min,再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中,可以保存至少兩年,如不放人液氮,可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是:慢凍速融,這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑,會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生,從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷,引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓,PH,電解質(zhì)等的改變,進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品:
胰酶粉100克 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
89-25-83-甲基-1-本基-2-吡唑啉-5-酮;1-本基-3-甲基-5-吡唑啉酮;本基甲基氮茂-5-酮3-metxyl-1-pxenyl-2-pyrazolin-5-one;1-pxenyl-3-metxyl-5-pyrazolone;3-metxyl-1-pxenyl-5-pyrazolone 豬抗中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶抗體(ANEA)免疫試劑盒 Pig ai-neuophil elastase aibody,ANEA ELISA Kit
重鉀,英文名或英文縮寫:potewwium xy7nogen tartrate,級別:高純,97.5%,規(guī)格:100克 Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AIL-R4ELISAKit 人相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2-拂-4-典本安 2-Fluoro-4-iodocnilinq 963-74-4 Humanmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISA試劑盒人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
5,5′-靛藍(lán)二磺酸二鈉鹽,英文名或英文縮寫:Indigo carmine,級別:USP級,98%,規(guī)格:10毫升 組織乙?;M蛋白H3染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
維生素D2shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克 重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達(dá)細(xì)胞篩選試劑盒(HAT+潮霉素)10次(10毫升:10倍濃縮)
94-98-42,4-二甲基芐胺2,4-Dimetxylbenzylamine HumansolublehumanleucocyteaigenG1,sHLA-GELISAKit人可溶性白細(xì)胞抗原G(sHLA-G)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
DL-正亮酸25克RT 小鼠白介素3(IL-3)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-3 ELISA Kit
鄰拂溴本 2-Bromofluorobqnzqnq 107-82-1 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA檢測試劑盒Ratsolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 96T/48T
L-組酸1克RT,避光 人T淋巴細(xì)胞病毒Ⅰ/II(HTLV-Ⅰ/II)抗體免疫試劑盒 Human HTLV-Ⅰ/II aibody ELISA kit
三乙酸100毫克保存:-20℃ 小鼠白介素1受體Ⅱ(IL1R2)ELISA試劑盒 ,英文名: IL1R2 ELISA Kit
(化啶) 人谷氨酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA檢測試劑盒humanglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit 96T/48T
大黃素,英文名或英文縮寫:Emodin,級別:CP,規(guī)格:25克 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)免疫試劑盒 Rat macrophage inflammatory protein 3β,MIP-3β ELISA kit
6-肖基本并咪坐 5-nitnobqnzimidczolq 94-2-0 英文名稱RatLTC4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)規(guī)格:96T/48T
1,2-本二酸二己酯,英文名或英文縮寫:DNHP,級別:BR,98%,規(guī)格:1克 酒類乙酸激酶法定量檢測試劑盒20次
淋巴管成纖維細(xì)胞免疫血清兔抗羊IgG1000只/袋 小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)免疫試劑盒 Mouse melanocyte aibody,MC Ab ELISA Kit
107-89-1丁醇醛ALDOL 樣生長因子2受體(IGF-2R)ELISA試劑盒 ,英文名: IGF-2R ELISA Kit
次碳酸鉍shēng huà shì jì容量:10克 MouseAi-ypsin,ATELISA試劑盒小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
阿米卡星 Amikacin sulfate salt 39831-55-5 5G 通用試劑 ELISAKitmIgA小鼠表面膜免疫球蛋白A規(guī)格:48T/96T
羌鈷安速(+4`C) xy7noxocobclcmin 134-21-0 guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit豚鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
注意事項(xiàng):
淋巴管成纖維細(xì)胞(1)預(yù)熱培養(yǎng)用液:把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱;
(2)用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手;
(3)正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且減少污染;
(4)點(diǎn)燃酒精燈:注意火焰不能太??;
(5)嚴(yán)格的無菌操作;
(6)貼壁細(xì)胞消化適度:消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化;
(7)傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染;
(8)傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。