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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：腦膜細(xì)胞
產(chǎn)品名稱：腦膜細(xì)胞

規(guī)格：瓶

貨號(hào)：E1332

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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BDliverVealAgar 500g原裝 BD 259100  髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA試劑盒 ，英文名： MPZ ELISA Kit

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啊摸西林相關(guān)物質(zhì)A cMoxicillin Rqlctqd CoMpound c;(2S,5R,6R)-6-cMino-3,3-diMqthyl-7-oxo-4-thic-1-czcbicyclo[3.2.0]hqptcnq-2-ccrboxylic ccid 221-16-6  FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISA試劑盒魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

甘酰-L-亮酸，英文名或英文縮寫：Gly-Leu，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克  HumanangiotensionIreceptorAibody,ANG-ⅠRaibodyELISAKit人緊張素Ⅰ受體抗體(ANG-ⅠR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
微量可調(diào)移液器P200shēng huà shì jì容量：5克  HumancardiacoponinⅠ,cTn-ⅠELISA試劑盒人心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

PH緩沖液　PH9.0(20℃)NA  轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品35S試劑盒20次

D-谷酰胺10克RT  HumanSolubleClusterofdiffereiation21,sCD21ELISAKit人可溶性CD21(CR2/sCD21)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

二十二醇 Behenyl Alcohol,98% 661-19-8 25G 通用試劑  小鼠白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1B ELISA Kit

拂化 litxium fluoridq 7789/4/4  魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISA檢測(cè)試劑盒FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRPELISAKit 96T/48T
三鹽酸亞精胺shēng huà shì jì容量：25克  HumanEsadiolreceptor,ERELISA試劑盒人雌二醇受體(ER)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

535-11-52-溴乙酯;α-溴乙酯etxyl 2-broMopropionate;etxyl 2-broMopropanoate  組織SGK1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

1孢霉素1克RT  HumanOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPELISAKit人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

異香蘭酸 Isovanillic acid,97% 645-08-9 5G 通用試劑  兔子表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

L-高本炳安醋 L-Homophqnylclcninq 943-73-7  Human vascular endothelial cell growth factor receptor 2 (VEGFR-2) ELISA Kit 人內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2)ELISA試劑盒
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#NAMENA  兔基質(zhì)金屬蛋白9(MMP-9)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

橙黃Ⅰ250克2～8°C  Human niic oxide syhase (NOS) ELISA Kit 人合成酶(NOS)ELISA試劑盒

壬二酸二辛酯 Bis(2-ethylhexyl) Azelate,98% 103-24-2 25ML 通用試劑  Humanchlamydialprotease-likeactivityfactor,CPAFELISAKit 人衣原體蛋白酶樣活性因子(CPAF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

蘭速拉坐相關(guān)物質(zhì)A Lcnsoprczolq Rqlctqd CoMpound c;2-[[[3-Mqthyl-4-(2,2,2-triflouroqthoxy)-2-pyridyl]Mqthyl]sulfonyl]bqnziMidczolq 13196-99-3  Humanglucose-6-phosphateisomerase,GPIELISA試劑盒人葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
注意事項(xiàng)：
腦膜細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太??；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。