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實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 
10×PCR buffer 
5 μl     dNTP mix （2mM） 
4 μl     引物1（10pM） 
2 μl     引物2（10pM） 
2 μl     Taq酶 （2U/μl） 
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
1 μl      加ddH2O至 50 μl 

本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無(wú)菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無(wú)菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類(lèi)和非探針類(lèi)兩類(lèi)，探針類(lèi)是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類(lèi)是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

溶菌酶（LZM）測(cè)試盒（帶標(biāo)準(zhǔn)）   Lysozyme (LZM) test case (with standard)  Ranitidine   66357-59-3  中文名：鹽酸雷尼替丁  分子式：C13H23ClN4O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織轉(zhuǎn)谷酰胺酶(TGM2)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TGM2 (ansglaminase 2, Tissue) ELISA Kit  3-[4-[(2-Chloro-5-iodophenyl)methyl]phenoxy]tetrahydro-furan  915095-94-2  中文名：  分子式：C17H16ClIO2  度：98.0%   

人組織因子途徑抑制因子(TFPI)酶聯(lián)吸附測(cè)定試劑盒   Human TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit  3-[2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-3-quinolinyl-2-propenal  148901-68-2  中文名：  分子式：C21H16FNO  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

人組織因子途徑抑制物elisa試劑盒   人組織因子途徑抑制物試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織因子途徑抑制物試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織因子途徑抑制物試劑盒、人組織因子途徑抑制物elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3-Amino-1-phenyl-2-pyrazolin-5-one 4149/6/8  中文名：3-氨基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮  分子式：C9H9N3O 

病毒H14亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法）人組織因子elisa試劑盒   人組織因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人組織因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組織因子試劑盒、人組織因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  3-Allylrhodanine  中文名：3-烯丙基羅丹寧  分子式：C6H7NOS2  度：99.0%
腎近端小管上皮細(xì)胞(HRPTEpiC)滑石粉(藥用級(jí),325目)Talc質(zhì)量規(guī)格：藥用級(jí),325目

CL-0203SCaBER(膀胱鱗癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2硼砂pH標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(硼砂PH(25℃)：9.18)pH standard－Borax質(zhì)量規(guī)格：硼砂PH(25℃)：9.18

*導(dǎo)管癌細(xì)胞;CFPAC-1 大鼠腦微內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL[Tyr8]緩激肽[Tyr8] Bradykinin質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

P815 小鼠肥大細(xì)胞癌細(xì)胞[Tyr9]- β-促激素 (豬)[Tyr9]- β-MSH (porcine)質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR

MGAT5 Others Human  MGAT5 / GG5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) α-心鈉素(1-28), humanα-ANF(1-28), human質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 滅菌丹標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=6%)N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=6%

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B惡草酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%)Oxadiazon質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%

LS174T細(xì)胞，細(xì)胞 色素瘤細(xì)胞,SK37細(xì)胞 成細(xì)胞;Saos-2甲基嘧啶1(10μg/ml,u=3%)Pirimiphos-methyl solution質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=3%

HCT 116(細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2撲滅津(標(biāo)準(zhǔn)品)Propazine質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

APOA1 Others Human  ApoAI 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 戊炔草胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Propyzamide質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品
Sulfadiazine  68-35-9  中文名：磺胺嘧啶  分子式：C10H10N4O2S    兔壞死因子-a(rabbit TNF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Rifampicin  13292-46-1  中文名：利福平  分子式：C43H58N4O12    兔干細(xì)胞因子(rabbit SCF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dyphylline  479-18-5  中文名：二羥丙茶堿  分子式：C10H14N4O4    兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-a(rabbit TGF-a)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sulfamethazine  57-68-1  中文名：磺胺二甲嘧啶  分子式：C12H14N4O2S    兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(rabbit TGF-b1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Lomefloxacin   98079-52-8  中文名：鹽酸洛美沙星  分子式：C17H20ClF2N3O3    兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-b2(rabbit TGF-b2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝