產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0258 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來(lái)源 | 骨肉瘤;SD大鼠 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說(shuō)明書 |
器官來(lái)源 | 詳見說(shuō)明書 |
免疫類型 | 詳見說(shuō)明書 |
品系 | 詳見說(shuō)明書 |
生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說(shuō)明書 |
物種來(lái)源 | 大鼠 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 大鼠細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱:UMR-106
種屬:大鼠
來(lái)源:;SD大鼠
培養(yǎng)基:McCoy’s *
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號(hào):AE0258
基本特性:
( 1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞大鼠細(xì)胞特價(jià)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
1,3-Bis(4,5-dihydro-2-oxazolyl)benzene 中文名:1,3-雙(4,5-二氫-2-惡唑)苯 分子式:C12H12N2O2 小鼠烷B2(mouse TXB2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
1,2-O-Isopropylidene-β-D-fructopyranose 中文名: 分子式:C9H16O6 小鼠組織多肽抗原(mouse TPA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
1,2-Cyclohexanedicarboximide 中文名: 分子式:O2 小鼠血小板生成素(mouse TPO) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
1,2-Bis(phenylthio)ethane 中文名:1,2-雙(苯硫基)乙烷 分子式:C14H14S2 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(mouse AIL/APO 2L) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
1,2-Bis(3-indenyl)ethane 中文名:1,2-雙(3-茚基)乙烷 分子式:C20H18 小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體1(mouse AIL R1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor receptor 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-R1 Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate 32249-35-7 中文名: 分子式:C7H10O3
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D(mouse VEGF-D) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate 114772-38-2 中文名: 分子式:C15H13BrO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子D 英文名稱: vascuiar endothelial growth factor D 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: VEGF-D Methyl 3-cyclopropyl-3-oxopropionate 32249-35-7 中文名: 分子式:C7H10O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Methyl 4'-methylbiphenyl-2-carboxylate 中文名: 分子式:C15H14O2 度:98.0%
小鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(mouse VEGF-C) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Methyl 4'-bromomethyl biphenyl-2-carboxylate 中文名: 分子式:C15H13BrO2
Atrazine 1912-24-9 中文名:阿特拉津 分子式:C8H14ClN5 山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
D(-)-Arginine 157-06-2 中文名:D-精氨酸 分子式:C6H14N4O2 山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benserazide 14919-77-8 中文名:鹽酸芐絲肼 分子式:C10H16ClN3O5 山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Trenbolone heptanoate N 中文名: 分子式:C25H34O3 山羊γ干擾素(IFN-γ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3H-1,2-Benzodithiol-3-one-1,1-dioxide 66304-01-6 中文名:3H-1,2-苯并二硫醇-3-酮-1,1-二氧化物 分子式:C7H4O3S2 山羊β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
大鼠細(xì)胞特價(jià)熱休克蛋白 27(HSP27) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Panaxydiol 中文名: 分子式:C17H24O2
曲拉通X-100 100ml 3-Amino-4-hydroxybenzoic acid 中文名:3-氨基-4-羥基苯甲酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0%
羥自由基檢測(cè) Hydroxyl radical detection Rasagiline mesylate 中文名:甲磺酸雷沙吉蘭 分子式:3S
羥脯酸測(cè)試前處理試劑 Preeatme reage hydroxyproline test Rengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4
羥脯酸(Hyp)測(cè)試盒 Glamine syhetase (GS) test kit Rengynic acid 517883-38-4 中文名: 分子式:C8H14O4
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。