產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0474 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 肝癌;男性 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人低轉(zhuǎn)移細胞 特價
簡稱:MHCC97L
種屬:人
來源:;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0474
使用方法:
收到細胞人低轉(zhuǎn)移細胞 特價后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3-Ethoxyandrosta-3,5-dien-17-one 972-46-3 中文名:3-乙氧基-雄甾-3,5-二烯-17-酮 分子式:C21H30O2 度:98.0% 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Ethoxy-4-ethoxycarbonyl phenylacetic acid 99469-99-5 中文名: 分子式:C13H16O5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid 162401-62-9 中文名: 分子式:C12H12F2O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Chloro-4-(3-fluorobenzyloxy)nitrobenzene 443882-99-3 中文名: 分子式:C13H9ClFNO3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠角化細胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
3-Chloro-1-(4-octylphenyl)-1-propanone 928165-59-7 中文名: 分子式:C17H25ClO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠蛋酸酯酶2B(PP-2B)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Crenulatin 中文名:大花紅天素 分子式:C11H20O6 度:98.5%
小鼠蛋酸酶elisa試劑盒 小鼠蛋酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠蛋酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠蛋酸酶試劑盒、小鼠蛋酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Cyromazine 中文名:環(huán)丙氨嗪 分子式:C6H10N6 度:98.0%
小鼠蛋酸酶(PP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Crenulatin 中文名:大花紅天素 分子式:C11H20O6
小鼠蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Creoside III 1038602-12-8 中文名: 分子式:C18H24O9
小鼠蛋白激酶elisa試劑盒 小鼠蛋白激酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠蛋白激酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠蛋白激酶試劑盒、小鼠蛋白激酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Cryptanoside A 中文名: 分子式:C30H42O10
總蛋白定量測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):BCA法)(微板法) Trityl candesartan cilexetil 170791-09-0 中文名: 分子式:C52H48N6O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
總蛋白定量測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):BCA法)(比色法) Rhein 中文名:大黃酸 分子式:C15H8O6 度:98.0%
總蛋白S 英文名稱: total protein S 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: TPS Perforatumone 中文名: 分子式:C35H52O5
總蛋白(TP)測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):雙縮脲法) Trityl candesartan cilexetil 170791-09-0 中文名: 分子式:C52H48N6O6
總蛋白(TP)測定試劑盒(帶標(biāo)準(zhǔn):考馬斯亮藍法) Ribavirin 中文名:利巴韋林 分子式:C8H12N4O5 度:98.0%
人低轉(zhuǎn)移細胞 特價Rhein 478-43-3 中文名:大黃酸 分子式:C15H8O6 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-Methylanthraquinone 84-54-8 中文名:2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O2 Human adenosine three phosphate binding cassette anspoer A1 (ABCA1) ELISA Kit 人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1(ABCA1)ELISA試劑盒
1-Hydroxy-2-methylanthraquinone 6268/9/3 中文名:1-羥基-2-甲基蒽醌 分子式:C15H10O3 Humanypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 人胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Anthraglycoside B 23313-21-5 中文名:大黃素-8-O-葡萄糖苷 分子式:C21H20O10 HumanDopamineD1receptor,D1RELISA試劑盒人多巴胺D1受體(D1R)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Torososide A 165689-32-7 中文名: 分子式:C38H32O15 組織NAD依賴性甘油-3-0酸脫氫酶(NAD-Glyceraldehyde-3-PhosphateDehydrogenase;NAD-GAPDH)活性光譜法定量檢測試劑盒20次