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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人現(xiàn)貨供應(yīng)
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
  • 貨號(hào):AE0876
  • 價(jià)格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-26
  • 更新日期: 2024-11-26
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號(hào) AE0876
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來(lái)源 肺腺癌
細(xì)胞形態(tài) 貼壁
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號(hào)
保質(zhì)期 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
器官來(lái)源 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
免疫類(lèi)型 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
品系 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
生長(zhǎng)狀態(tài) 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
物種來(lái)源
包裝規(guī)格 1×106
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng): 人現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱(chēng):PAa

種屬:人

來(lái)源:肺腺癌

培養(yǎng)基:1640

狀態(tài):貼壁

產(chǎn)品規(guī)格:1×106

單位:T25/

貨號(hào):AE0876
基本特性:
1 )組織來(lái)源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人現(xiàn)貨供應(yīng)后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45烘箱烘干(切記保持無(wú)菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開(kāi), 內(nèi)膜面向上,無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min。
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
4-Aminohippuric acid  中文名:4-氨基馬尿酸  分子式:C9H10N2O3  度:98.0%  凋亡相關(guān)因子配體   英文名稱(chēng):   apoptosis-inducing factor Fas Ligand   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   Fas Ligand

3-Amino-3-phenylpropionic acid  中文名:C9H11NO2  分子式:C9H11NO2  度:98.0%  小鼠酸性成纖維生長(zhǎng)因子   英文名稱(chēng):   acid fibroblast growth factor   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫(xiě):   a-FGF

6-Aminopenicillanic acid  中文名:6-氨基青霉烷酸  分子式:C8H12N2O3S  度:98.0%  小鼠促黃體生成激素(mouse LH)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

3-Amino-5-mercapto-1,2,4-triazole  中文名:3-氨基-5-巰基-1,2,4-三唑  分子式:C2H4N4S  度:98.0%  小鼠溶菌酶(mouse Lysozyme)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  中文名:4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%  小鼠巨嗜細(xì)胞趨化蛋白-1(mouse MCP-1)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝
小鼠DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzoyl-DL-mine  4703-38-2  中文名:苯甲?;?/span>-DL-蛋氨酸  分子式:C12H15NO3S  度:98.0%   

小鼠C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzoyl-DL-mine  4703-38-2  中文名:苯甲?;?/span>-DL-蛋氨酸  分子式:C12H15NO3S 

小鼠C-(mouse C-peptide)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝     Dioscin  19057-60-4  中文名:薯蕷皂苷  分子式:C45H72O16 

小鼠C(C-Peptide)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Benzoyl leuco methylene blue  中文名:芐酰基無(wú)色亞甲基蘭  分子式:C23H23N3OS  度:98.0%

小鼠C(C-Peptide)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Gracillin  19083-00-2  中文名:纖細(xì)薯蕷皂苷  分子式:C45H72O17
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Schleicheol 2  256445-68-8  中文名:  分子式:C30H52O2 

豬白介素1βelisa試劑盒   豬白介素1β試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬白介素1β試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白介素1β試劑盒、豬白介素1βeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Tenacissoside G  中文名:通關(guān)藤苷分子式:C42H64O14 

豬白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Tenacissoside F  928151-78-4  中文名:通關(guān)藤苷分子式:C35H56O12  度:關(guān)鍵詞:  通關(guān)藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

豬白介素1β(IL-1β)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Tenacissoside H  中文名:通關(guān)藤苷分子式:C42H66O14  度:98.0%

豬白介素1αelisa試劑盒   豬白介素1α試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   豬白介素1α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白介素1α試劑盒、豬白介素1αeisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  Tenacissoside G  191729-43-8  中文名:通關(guān)藤苷分子式:C42H64O14  度:關(guān)鍵詞:  通光散; 通關(guān)藤; 孕甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
人現(xiàn)貨供應(yīng)Pentoxyverine   中文名:枸櫞酸噴托維林  分子式:C26H39NO10  度:98.0%  小鼠蛋白激酶elisa試劑盒   小鼠蛋白激酶試劑盒   規(guī)格型號(hào):96T/48T   小鼠蛋白激酶試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠蛋白激酶試劑盒、小鼠蛋白激酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個(gè)月。  

Dioxopromethazine   中文名:鹽酸二氧丙嗪  分子式:C17H21ClN2O2S  度:99.0%  小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Aspirin  中文名:阿司匹林  分子式:C9H8O4  度:99.0%  小鼠熱休克蛋白60(mouse Hsp-60)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Oxytetracycline   中文名:鹽酸土霉素  分子式:C22H25ClN2O9  度:98.0%  小鼠組胺(mouse HIS)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝

Flumequine  中文名:氟甲喹  分子式:C14H12FNO3  度:98.0%  小鼠肝生素(mouse HGF)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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