產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01490 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 喉鱗癌;淋巴結轉移;男性 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人喉鱗癌細胞直銷
簡稱:PCI-04B
種屬:人
來源:喉鱗癌;淋巴結轉移;男性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01490
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞人喉鱗癌細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
6-Aminouracil 873-83-6 中文名:6-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0% 小鼠損傷分子1(Kim-1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminoquinoxaline 6298-37-9 中文名:6-氨基喹喔啉 分子式:C8H7N3 度:98.0% 小鼠抗單核細胞抗體(AMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminopenicillanic acid 551-16-6 中文名:6-氨基青霉烷酸 分子式:C8H12N2O3S 度:98.0% 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminonicotinic acid 3167-49-5 中文名:6-氨基煙酸 分子式:C6H6N2O2 度:98.0% 小鼠纖連蛋白(FN)ELISAKit ELISA. 96T/48T
6-Aminoindole 5318-27-4 中文名:6-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0% 小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Deferasirox 201530-41-8 中文名:地拉羅司 分子式:C21H15N3O4
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISAKit ELISA. 96T/48T Deflazacort 中文名:地夫可特 分子式:C25H31NO6 度:98.0%
小鼠谷胱甘肽巰基轉移酶(GST)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Deferasirox 中文名:地拉羅司 分子式:C21H15N3O4 度:99.0%
小鼠谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Deferasirox 中文名:地拉羅司 分子式:C21H15N3O4
小鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Deferasirox 201530-41-8 中文名:地拉羅司 分子式:C21H15N3O4 度:99.0%
Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol 289056-24-2 中文名: 分子式:C29H50O3 HumanplateletmembraneglycoproteinⅣ,GP-ⅣELISAKit人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Sitosteryl palmitate 2308-85-2 中文名:β-谷甾醇棕櫚酸酯 分子式:C45H80O2 兔子紅細胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
22-Dehydroclerosterol glucoside 143815-99-0 中文名: 分子式:C35H56O6 Human thymus depende aigen (TD-Ag) ELISA Kit 人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)ELISA試劑盒
22-Dehydroclerosterol 26315-07-1 中文名:22-去氫赤桐甾醇 分子式:C29H46O Humanai-redcellaibodyELISAKit 人抗紅細胞抗體(RBC)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Stigmastane-3β,5α,6β-triol 20835-91-0 中文名:豆甾-3β,5α,6β-三醇 分子式:C29H52O3 humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember2ELISA試劑盒人嗜酸性相關之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
人喉鱗癌細胞直銷Senkyunolide H 94596-27-7 中文名: 分子式:C12H16O4 度:96.0% 關鍵詞: 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Senkyunolide G 94530-85-5 中文名:洋川芎內(nèi)酯G 分子式:C12H16O3 度:% 關鍵詞: 小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Senkyunolide E 94530-83-3 中文名: 分子式:C12H12O3 度:% 關鍵詞: 川芎; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血小板相關抗體IgG 英文名稱: platelet-associated aibody IgG 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PAIgG
Senkyunolide C 91652-78-7 中文名:洋川芎內(nèi)酯C 分子式:C12H12O3 度:96.0% 關鍵詞: 小鼠增殖細胞核抗原 英文名稱: Proliferating Cell Nuclear Aigen 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PCNA
Schleicheol 2 256445-68-8 中文名: 分子式:C30H52O2 度:% 關鍵詞: 豆甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠血小板生長因子 英文名稱: plateler-derived growth factor 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PDGF
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。