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基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人滑膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：HFLS

種屬：人

來(lái)源：滑膜；成纖維細(xì)胞

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0553

使用方法：
收到細(xì)胞人滑膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

6-Benzyloxyindole  中文名：6-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO    NADP0酸酶（NADPase）測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

6-Aminouracil  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2    6-0酸葡萄糖脫氫酶（G6PDH）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/48樣           

6-Aminoquinoxaline  中文名：6-氨基喹喔啉  分子式：C8H7N3    乙酸銨 (醋酸銨)   100g

6-Aminopenicillanic acid  中文名：6-氨基青霉烷酸  分子式：C8H12N2O3S    AmmoniumAcetate   500g

6-Aminonicotinic acid  中文名：6-氨基煙酸  分子式：C6H6N2O2    化銨   100g
內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體 1(VEGF-R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Otophylloside B 4'''-O-β-D-cymaropyranoside  171422-85-8  中文名：  分子式：C56H90O19  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF-D  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  168001-54-5  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.0%  關(guān)鍵詞：  孕甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF-C  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19 

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF-A  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  中文名：  分子式：C56H90O19  度：97.0%

內(nèi)皮生長(zhǎng)因子165   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor 165   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   VEGF165  Otophylloside B 4'''-O-β-D-oleandropyranoside  168001-54-5  中文名：  分子式：C56H90O19
7α-Hydroxystigmasterol  中文名：7α-羥基豆甾醇  分子式：C29H48O2  度：%  兔半胱酸蛋白酶抑制劑C   英文名稱：   Rabbit Cystatin C   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   CSTC

Stigmast-5-ene-3β,7α,16β-triol  中文名：  分子式：C29H50O3  度：93.0%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-12(rabbit MMP-12)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Sitosteryl palmitate  中文名：β-谷甾醇棕櫚酸酯  分子式：C45H80O2  度：90.0%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-13(rabbit MMP-13)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

22-Dehydroclerosterol glucoside  中文名：  分子式：C35H56O6  度：%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-3(rabbit MMP-3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

22-Dehydroclerosterol  中文名：22-去氫赤桐甾醇  分子式：C29H46O  度：94.0%  兔基質(zhì)金屬蛋白酶-9(rabbit MMP-9)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝
人滑膜成纖維細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)山羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2  度：98.0%   

山羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzoylthiazolidine-2-thione  70326-37-3  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2 

山羊白介素10elisa試劑盒   山羊白介素10試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   山羊白介素10試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：山羊白介素10試劑盒、山羊白介素10 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     3-Cyclopropylmethoxy-4-difluoromethoxybenzoic acid  中文名：  分子式：C12H12F2O4 

山羊白介素10(IL-10)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  3-Benzalphthalide  中文名：3-亞芐基苯酞  分子式：C15H10O2  度：98.0%

山羊白介素10(IL-10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              3-Benzoylthiazolidine-2-thione  中文名：3-苯甲酰噻唑烷-2-硫酮  分子式：C10H9NOS2