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使用方法：
收到細(xì)胞人甲狀腺鱗癌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人甲狀腺鱗癌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡(jiǎn)稱：SW579[SW579;SW-579]

種屬：人

來(lái)源：甲狀腺鱗癌；男性

培養(yǎng)基：L15

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0216

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

7-Amino-4-methylcoumarin  26093-31-2  中文名：7-氨基-4-甲基香豆素  分子式：C10H9NO2  度：98.0%      小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

7-Amino-3-methyl-3-cephem-4-carboxylic acid  22252-43-3  中文名：  分子式：C8H10N2O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

7-Acetoxy-4-methylcoumarin  2747/5/9  中文名：7-乙酰氧基-4-甲基香豆素  分子式：C12H10O4  度：95.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

7,8-Dimethoxy-1,3-dihydro-2H-3-benzazepin-2-one  73942-87-7  中文名：  分子式：C12H13NO3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

6β-Hydroxystigmast-4-en-3-one  36450-02-9  中文名：6β-羥基豆甾-4-烯-3-酮  分子式：C29H48O2  度：95.0%  關(guān)鍵詞：  菜豆; 櫟木; 接骨木屬; 豆甾烷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)  小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  Fingolimod  162359-55-9  中文名：芬戈莫德  分子式：C19H33NO2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dehydroepiandrosterone acetate  853-23-6  中文名：醋酸去氫表雄酮  分子式：C21H30O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Dehydroadynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H62O17  度：96.0%

小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Dregeoside Ga1  98665-66-8  中文名：  分子式：C49H80O17 

小鼠骨成型蛋白-2   英文名稱：   Bone morphogenetic protein-2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   BMP-2  Dehydroadynerigenin glucosyldigitaloside  中文名：  分子式：C36H52O13  度：98.5%
3,5-Cycloergosta-6,8(14),22-triene  24352-51-0  中文名：  分子式：C28H42    Humanai-nuclearfactorAibody,ANFELISAKit 人抗核因子抗體(ANF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Ergosterol  57-87-4  中文名：麥角甾醇  分子式：C28H44O    humaneosinophil-associatedribonucleaseAfamilymember12,EAR12ELISA試劑盒人嗜酸性相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

α-Spinasterol  481-18-5  中文名：α-菠甾醇  分子式：C29H48O    組織PKG-II激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

α-Spinasterone  23455-44-9  中文名：  分子式：C29H46O    HumanpapillomavirusIgM,HPV-IgMELISAKit人狀瘤病毒抗體IgM(HPV-IgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

3β-Hydroxyergost-5-en-7-one  156767-69-0  中文名：  分子式：C28H46O2    兔子壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人甲狀腺鱗癌細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Sertaconazole  中文名：舍他康唑  分子式：C20H15Cl3N2OS    植物酸(JA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sennoside B  中文名：番瀉苷B  分子式：C42H38O20    植物激素脫落酸(ABA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Sennoside A  中文名：番瀉苷A  分子式：C42H38O20    植物過(guò)氧化物酶（POD）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Senkyunolide S  中文名：  分子式：C12H16O5    植物銅鋅超氧化物歧化酶（CuZn-SOD）測(cè)試盒（比色法）

Senkyunolide R  中文名：  分子式：C12H16O5    乙酰膽堿（ACH）測(cè)定試劑盒（測(cè)血清）（微板法）

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。