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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE0147 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 結(jié)腸腺癌；肺轉(zhuǎn)移；男性 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：T84
種屬：人
來源：腺癌；肺轉(zhuǎn)移；男性
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE0147
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
9-Anthracenecarboxylic acid 中文名：9-蒽甲酸 分子式：C15H10O2 磺酸 SHES 25g
9-Aminominocycline 中文名： 分子式：C23H29ClN4O7 Isicacidsalt 100g
9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene 中文名：9,9-雙[4-(2-羥乙氧基)苯基]芴 分子式：C29H26O4 乙型 英文名稱： Influenza B HA 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： HA
9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴 分子式：C25H18O2 甲型H3N2HA1 英文名稱： Influenza A H3N2 HA1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： H3N2 HA1
9,9-Bis(4-amino-3-methylphenyl)fluorene 中文名：9,9-雙(4-氨基-3-甲苯基)芴 分子式：C27H24N2 生長(zhǎng)激素 英文名稱： growth hormone 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： HGH
含量測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/48樣 Pemetrexed di 中文名：培美曲塞二鈉 分子式：C21H23N5Na2O6 度：98.0%
調(diào)節(jié)蛋白 (Thrombomodulin/sCD141) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 法國(guó) Diaclone Rosuvastain Calcium 中文名：瑞舒伐他汀鈣 分子式：C22H28FN3O6S
素B2 英文名稱： Thromboxane B2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TXB2 Pemetrexed 中文名：培美曲塞二鈉 分子式：C20H21N5O6 度：98.0%
素B2 英文名稱： Human Thromboxanes B2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TXB2 Pefloxacin mesylate 70458-95-6 中文名：甲磺酸培氟沙星 分子式：C18H24FN3O6S 度：98.0%
素B2 英文名稱： Human Thromboxane B2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： TXB2 Pefloxacin mesylate 中文名：甲磺酸培氟沙星 分子式：C18H24FN3O6S
Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol 中文名： 分子式：C29H48O2 度：97.5% 兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Dregeoside Da1 中文名： 分子式：C42H70O15 度：% 兔內(nèi)皮素-1(rabbit ET-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Dehydroadynerigenin digitaloside 中文名： 分子式：C30H42O8 度：97.0% 兔纖維蛋白原降解產(chǎn)物(rabbit FDP) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Cardenolide B-1 中文名： 分子式：C30H44O8 度：98.0% 兔促卵泡素(rabbit FSH) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Drevogenin A 中文名： 分子式：C28H42O7 度：% 兔堿性成纖維生長(zhǎng)因子(rabbit b-FGF/FGF-2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
人腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞直銷生存素 (survivin) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 Anthraflavic acid 中文名：二羥蒽醌 分子式：C14H8O4
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素3 英文名稱： Neuroophin-3 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： -3 3-Hydroxychimaphilin 中文名：3-羥基梅笠草素 分子式：C12H10O3
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 4(-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 96T 原裝進(jìn)口 3-Methyl-1-(2-piperidinophenyl)butylamine N-acetylglutamate salt 219921-94-5 中文名： 分子式：C23H37N3O5 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 4(-4) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名： 分子式：C5H6O2
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)素 3(-3) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 3-Methoxyfuran 3420-57-3 中文名： 分子式：C5H6O2 度：99.0% 關(guān)鍵詞： 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
