產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01101 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 卵巢內(nèi)膜癌;腹水轉(zhuǎn)移;女性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷
簡稱:SNU-251
種屬:人
來源:卵巢內(nèi)膜癌;腹水轉(zhuǎn)移;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01101
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Androstenediol-3-acetate 中文名:雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式:C21H32O3 髓過氧化物酶(MPO)檢測 Myeloperoxidase (MPO) detection
Androstenediol 中文名:雄烯二醇 分子式:C19H30O2 酶(CAT)檢測 Catalase (CAT) detection
Androstanolone heptanoate 中文名:雄諾龍庚酸酯 分子式:C26H42O3 總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒(比色法)
Androstanolone acetate 中文名:雄諾龍醋酸酯 分子式:C21H32O3 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)測定試劑盒(比色法)
Androstanolone 17-benzoate 中文名:雄諾龍苯甲酸酯 分子式:C26H34O3 二(MDA)測定試劑盒(TBA法)
鹽酸胍 100g Zileuton 111406-87-2 中文名:齊留通 分子式:C11H12N2O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
鹽快速測試盒 Niate rapid test case 4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester 中文名: 分子式:C16H16N4O3
亞鹽快速測試盒 Niite rapid test case Physapruin A 中文名: 分子式:C28H38O7 度:96.5%
亞鹽測定試劑盒(比色法) Physaminimin C 中文名: 分子式:C28H38O8 度:98.0%
亞鹽測定試劑盒 Sulfite determination kit Rebeprazole 117976-90-6 中文名:雷貝拉唑鈉 分子式:C18H20N3NaO3S
rsodeoxycholic acid 中文名:熊去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.0% 兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Deoxycholic acid 中文名:去氧膽酸 分子式:C24H40O4 度:98.5% 兔細(xì)胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Timosaponin AIII 中文名:知母皂苷AIII 分子式:C39H64O13 度:98.5% 兔干擾素-a(rabbit IFN-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Diosgenin 中文名:薯蕷皂苷元 分子式:C27H42O3 度:98.0% 兔干擾素-β(rabbit IFN-β) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
Sarsasapogenin 中文名:菝葜皂苷元 分子式:C27H44O3 度:99.0% 兔干擾素-r(rabbit IFN-r) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
人卵巢內(nèi)膜癌細(xì)胞直銷髓過氧化物酶(MPO)測定試劑盒 Ranolazine 中文名:雷諾嗪 分子式:C24H33N3O4
酸性轉(zhuǎn)化酶(AI)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Withanolide S 63139-16-2 中文名:醉茄內(nèi)酯S 分子式:C28H40O8 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
酸性酯酶染液 Eosinstain 4,4'-Diaminodiphenylsulfone 80-08-0 中文名:4,4'-二氨基二苯砜 分子式:C12H12N2O2S 度:98.0%
酸性品紅(復(fù)紅) 5g 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名:4,4'-環(huán)亞己基雙苯酚 分子式:C18H20O2 度:98.0%
酸性木聚糖酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 中文名:庚酸睪酮 分子式:C26H40O3
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。