產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
品牌 | 帛科 |
貨號 | BK-P64517 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
包裝規(guī)格 | 50次 |
純度 | 詳見說明書% |
CAS編號 | |
是否進口 | 是 |
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒 |
50次 |
BK-P64517 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其完全溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量(包括*定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR
中性粒細胞蛋白酶抑制劑Elafin 英文名稱: neuophil elastase inhibitor Elafin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: Elafin β-Sitosterol 83-46-5 中文名:β-谷甾醇 分子式:C29H50O
中性粒細胞彈性蛋白酶 英文名稱: Neuophil elastase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: NE Tetracaine 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 度:98.0%
中性蛋白酶測試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Tetracaine 中文名:鹽酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2 度:98.0%
中心粒細胞彈性蛋白酶 (Neuophil elastase) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Testosterone isocaproate 15262-86-9 中文名:異己酸 分子式:C25H38O3
中文名稱 方法 規(guī)格 Tolvaptan 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 度:98.0%
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細胞;KMY0922布林佐胺(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Brinzolamide
PROCR Others Human Epcr / PROCR 細胞裂解液 (陽性對照) 羅硝唑質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRRonidazole
129小鼠胚胎干細胞 The 129 mouse embryonic stem cells萘酚AS-MX1酸酯(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCNaphthol AS-MX phosphate
U-2 OS細胞,細胞 黃綠青霉 正常細胞;Hs 578Bst草酸鉀一水(>98%,BC)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BCPotassium oxalate, monohydrate
SW 780(膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×21酸氫鈉一水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR bitartrate, monohydrate
胚;MRC-5氟蟲脲(標(biāo)準(zhǔn)品)Flufenoxuron質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%
PGA4 Others Human PGA4 / Pepsinogen A 細胞裂解液 (陽性對照) 氟磺胺草(標(biāo)準(zhǔn)品)Fomesafen質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
Hce-8693 盲腸腺癌細胞(未分化)氟酰胺(標(biāo)準(zhǔn)品)Flutolanil質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%
293T胚腎細胞 Human embryonic kidney cell line 293T 胚腎細胞氟硅唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Flusilazole質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%
CD40LG Protein Human 重組 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)銳勁特(標(biāo)準(zhǔn)品)Fipronil質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
Ethyl 13-hydroxy-α-linolenate 中文名: 分子式:C20H34O3 豬藍耳病毒elisa試劑盒 豬藍耳病毒試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬藍耳病毒試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬藍耳病毒試劑盒、豬藍耳病毒eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Ethyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 中文名: 分子式:C20H36O3 豬內(nèi)皮素 英文名稱: Porcine Endothelin 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ET-1
Ethyl (1-hydroxy-4-oxocyclohexa-2,5-dien-1-yl)acetate 中文名: 分子式:C10H12O4 豬上腺素 英文名稱: Porcine 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EPI
Ethopabate 中文名:乙氧酰胺苯甲酯 分子式:C12H15NO4 豬游離脂肪酸 英文名稱: Porcine free Fatty Acid 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FFA
Estrone 中文名:雌酮 分子式:C18H22O2 豬樣生長因子2 英文名稱: Porcine Insulin like Growth Factor 2 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IGF-2
轉(zhuǎn)基因品系水稻BT63探針法qPCR試劑盒本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。