產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號(hào) | AE0524 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 心肌 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號(hào) | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人胚心肌組織來源細(xì)胞價(jià)格
簡稱:CCC-HHM-2
種屬:人
來源:心肌
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號(hào):AE0524
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人胚心肌組織來源細(xì)胞價(jià)格后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Boldenone undecylenate 13103-34-9 中文名:寶丹酮十一烯酸酯 分子式:C30H44O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Boldenone acetate 2363-59-9 中文名:寶丹酮醋酸酯 分子式:C21H28O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠腺來源的內(nèi)皮生長因子(EG-VEGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Boldenone 846-48-0 中文名:寶丹酮 分子式:C19H26O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠內(nèi)(ET)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Boc-3-Phenylisoserine 145514-62-1 中文名: 分子式:C14H19NO5 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠內(nèi)皮細(xì)胞合酶(mouse eNOS) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
Bisphenol P 2167-51-3 中文名:雙酚P 分子式:C24H26O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠雌二醇(mouse E2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISAKit ELISA. 96T/48T Boldenone 846-48-0 中文名:寶丹酮 分子式:C19H26O2
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Docetaxel 中文名:多西他賽 分子式:C43H53NO14
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(mouse SDF-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Docetaxel 中文名:多西他賽 分子式:C43H53NO14 度:98.0%
小鼠基質(zhì)裂解素(ST2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Docosanoic acid 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Docosanoic acid 112-85-6 中文名:二十二烷酸 分子式:C22H44O2 度:% 關(guān)鍵詞:
4-Hydroxysapriparaquinone 120278-25-3 中文名: 分子式:C20H26O4 兔子內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Phyllostine 27270-89-9 中文名: 分子式:C7H6O4 Rat thrombospondin / thrombin sensitive protein 1 (TSP-1) ELISA Kit 大鼠血小板反應(yīng)蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA試劑盒
2-Methoxystypandrone 85122-21-0 中文名: 分子式:C14H12O5 Humanimmunoglobulinheavychainvariableregion,IgHVELISAKit 人球蛋白重鏈可變區(qū)(IgHV)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Lapachol 84-79-7 中文名:拉帕醇 分子式: HumandysophinELISA試劑盒人肌養(yǎng)蛋白(dysophin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Deoxylapachol 3568-90-9 中文名: 分子式:C15H14O2 組織P38β2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
人胚心肌組織來源細(xì)胞價(jià)格Sulfamonomethoxine 38006-08-5 中文名:磺胺間甲氧嘧啶鈉 分子式:C11H11N4NaO3S 度:98.0% 小鼠溶菌酶(LZM)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Sulfamonomethoxine 1220-83-3 中文名:磺胺間甲氧嘧啶 分子式:C11H12N4O3S 度:98.0% 小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Sulfamethoxazole 723-46-6 中文名:磺胺甲噁唑 分子式:C10H11N3O3S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Sulfamethazine 57-68-1 中文名:磺胺二甲嘧啶 分子式:C12H14N4O2S 度:99.0% 小鼠樣生長因子2(IGF-2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Sulfaguanidine 57-67-0 中文名:磺胺脒 分子式:C7H10N4O2S 度:99.0% 小鼠樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。