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上海帛科生物技術(shù)有限公司
   
     
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人細(xì)胞直銷
  • 品牌:帛科
  • 產(chǎn)地:科研
  • 貨號:AE0197
  • 價格: ¥1200/盒
  • 發(fā)布日期: 2020-10-27
  • 更新日期: 2024-11-25
產(chǎn)品詳請
產(chǎn)地 科研
保存條件 低溫冷藏
品牌 帛科
貨號 AE0197
用途 公司產(chǎn)品僅用于科研
組織來源 良性前列腺增生;男性
細(xì)胞形態(tài) 貼壁
是否是腫瘤細(xì)胞
CAS編號
保質(zhì)期 詳見說明書
器官來源 詳見說明書
免疫類型 詳見說明書
品系 詳見說明書
生長狀態(tài) 詳見說明書
物種來源
包裝規(guī)格
純度 %
是否進(jìn)口

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞直銷
簡稱:BPH-1

種屬:人

來源:良性;男性

培養(yǎng)基:DMEM

狀態(tài):貼壁

產(chǎn)品規(guī)格:

單位:

貨號:AE0197
基本特性:
1 )組織來源于正常人肺組織。
2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色。
3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
5 )肌動蛋白, alpha-SMA Desmin 免疫熒光染色驗證。
6 )不含有 HIV-1 、 HBV HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1.
取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入375% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2.
待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3.
細(xì)胞傳代
1)
吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2)
添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3)
用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4)
待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實驗操作:
1
、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45烘箱烘干(切記保持無菌),4冰箱放置,備用。
2
、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3
、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S1 × PBS pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4
、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS pH 7.4 )洗滌3次。
5
、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6
、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37水浴消化15min
7
、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按11加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8
、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9
、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10
、培養(yǎng):放置于37,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Cholesterol  57-88-5  中文名:膽固醇  分子式:C27H46O  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorpheniramine maleate  113-92-8  中文名:馬來酸氯苯那敏  分子式:C20H23ClN2O4  度:98.0%      小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Chlorotetracycline  57-62-5  中文名:金霉素  分子式:C22H23ClN2O8  度:98.0%      小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit   ELISA.   96T/48T            

Chlorogenic acid  327-97-9  中文名:綠原酸  分子式:C16H18O9  度:98.0%  關(guān)鍵詞:  *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(F-Ag)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Chlorhexidine acetate  56-95-1  中文名:醋酸氯己定  分子式:C26H38Cl2N10O4  度:98.0%  關(guān)鍵詞:    小鼠凝血因子Ⅱ(F)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2)   作用:   ELISA   規(guī)格:   48T/96T   進(jìn)口分裝  Lafutidine  中文名:拉呋替丁  分子式:C22H29N3O4S 

小鼠堿性0酸酶elisa試劑盒   小鼠堿性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號:96T/48T   小鼠堿性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠堿性0酸酶試劑盒、小鼠堿性0酸酶eisa試劑盒   保存條件:2-8   保質(zhì)期:6個月。  Ergosterol peroxide  2061-64-5  中文名:過氧化麥角甾醇  分子式:C28H44O3  度:96.0%  關(guān)鍵詞:  ; ; 抗結(jié)核分枝桿菌; 菠蘿; 寬葉香蒲; 麥角甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Dregeoside A11  中文名:  分子式:C55H88O22  度:%

小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Dehydroadynerigenin β-neritrioside  143212-60-6  中文名:  分子式:C42H62O17 

小鼠堿性0酸酶   英文名稱:   Mouse Alkaline phosphatase   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   ALP  D-Pinitol  中文名:D-松醇  分子式:C7H14O6  度:98.0%
Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate)  177602-14-1 
中文名:  分子式:C29H58O5    HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

2-C-Methyl-D-erythritol  58698-37-6  中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇  分子式:C5H12O4    HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol  129141-48-6  中文名:  分子式:C8H16O4    組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20(10樣本)

Linderaspirone A  1235126-46-1  中文名:  分子式:C34H32O10    HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester  124111-47-3  中文名:  分子式:C26H52O3    兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞直銷Tebipenem pivoxil  中文名:泰比培南酯  分子式:C22H31N3O6S2    醇脫氫酶(ADH)試劑盒   紫外分光光度法    50/48

Tazobactam acid  中文名:他唑巴坦酸  分子式:C10H12N4O5S    脂氧合酶(LOX)試劑盒   紫外分光光度法    50/48

Taxilluside A  中文名:  分子式:C18H24O10    ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒   可見分光光度法   10/9           

Tauroursodeoxycholic acid  中文名:牛磺熊去氧膽酸  分子式:C26H45NO6S    脂肪酸合成酶   英文名稱:   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   FASN

Taurocholic acid  中文名:?;悄懰?/span>  分子式:C26H45NO7S    脂肪酸合成酶   英文名稱:   Human Fatty Acid Syhase   規(guī)格:   48T/96T   英文縮寫:   FASN
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1
)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2
)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3
)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1
)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。


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