產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0197 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 良性前列腺增生;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人細(xì)胞直銷
簡稱:BPH-1
種屬:人
來源:良性;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0197
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Cholesterol 57-88-5 中文名:膽固醇 分子式:C27H46O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠α半乳糖基抗原(α-Gal)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorpheniramine maleate 113-92-8 中文名:馬來酸氯苯那敏 分子式:C20H23ClN2O4 度:98.0% 小鼠β基己糖苷酶A(β-HexA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorotetracycline 57-62-5 中文名:金霉素 分子式:C22H23ClN2O8 度:98.0% 小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Chlorogenic acid 327-97-9 中文名:綠原酸 分子式:C16H18O9 度:98.0% 關(guān)鍵詞: *; 抗氧化; 莽草酸; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Chlorhexidine acetate 56-95-1 中文名:醋酸氯己定 分子式:C26H38Cl2N10O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠堿性成纖維生長因子(mouse b-FGF/FGF-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Lafutidine 中文名:拉呋替丁 分子式:C22H29N3O4S
小鼠堿性0酸酶elisa試劑盒 小鼠堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠堿性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠堿性0酸酶試劑盒、小鼠堿性0酸酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Ergosterol peroxide 2061-64-5 中文名:過氧化麥角甾醇 分子式:C28H44O3 度:96.0% 關(guān)鍵詞: ; ; 抗結(jié)核分枝桿菌; 菠蘿; 寬葉香蒲; 麥角甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Dregeoside A11 中文名: 分子式:C55H88O22 度:%
小鼠堿性0酸酶(ALP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Dehydroadynerigenin β-neritrioside 143212-60-6 中文名: 分子式:C42H62O17
小鼠堿性0酸酶 英文名稱: Mouse Alkaline phosphatase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ALP D-Pinitol 中文名:D-松醇 分子式:C7H14O6 度:98.0%
Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosanoate) 177602-14-1 中文名: 分子式:C29H58O5 HumanCaspase-9,Casp-9ELISAKit 人胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
2-C-Methyl-D-erythritol 58698-37-6 中文名:2-C-甲基-D-赤蘚糖醇 分子式:C5H12O4 HumanD-LactateDehydrogenase,D-LDHELISA試劑盒人D-乳酸脫氫酶(D-LDH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-(2,2-Dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)propane-1,2-diol 129141-48-6 中文名: 分子式:C8H16O4 組織NADPH氧化酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次(10樣本)
Linderaspirone A 1235126-46-1 中文名: 分子式:C34H32O10 HumanPhosphoglucomase,PGMELISAKit人0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
2-Hydroxytetracosanoic acid ethyl ester 124111-47-3 中文名: 分子式:C26H52O3 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人細(xì)胞直銷Tebipenem pivoxil 中文名:泰比培南酯 分子式:C22H31N3O6S2 醇脫氫酶(ADH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Tazobactam acid 中文名:他唑巴坦酸 分子式:C10H12N4O5S 脂氧合酶(LOX)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
Taxilluside A 中文名: 分子式:C18H24O10 ?;D(zhuǎn)移酶(AAT)試劑盒 可見分光光度法 10管/9樣
Tauroursodeoxycholic acid 中文名:牛磺熊去氧膽酸 分子式:C26H45NO6S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN
Taurocholic acid 中文名:?;悄懰?/span> 分子式:C26H45NO7S 脂肪酸合成酶 英文名稱: Human Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FASN
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。