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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE01022 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 食管癌 |
| 細胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人細胞特價
簡稱：NEC
種屬：人
來源：
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE01022
使用方法：
收到細胞人細胞特價后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Dimethylolurea 中文名：雙羥甲脲 分子式：C3H8N2O3 度：98.0% 小鼠白介素5(IL-5)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,4'-Bis(2-benzoxazolyl)stilbene 中文名：4,4'-雙(2-苯并惡唑基)芪 分子式：C28H18N2O2 度：98.0% 小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
1,4-Bis(2-benzoxazolyl)naphthalene 中文名：1,4-雙(2-苯并惡唑基)萘 分子式：C24H14N2O2 度：98.0% 小鼠白介素35（IL-35）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
4,4'-Diaminodiphenylsulfone 中文名：4,4'-二氨基二苯砜 分子式：C12H12N2O2S 度：98.0% 小鼠白介素-33(IL-33)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
9,9-Bis(4-hydroxyphenyl)fluorene 中文名：9,9-雙(4-羥苯基)芴 分子式：C25H18O2 度：98.0% 小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠0脂酰肌醇抗體elisa試劑盒 小鼠0脂酰肌醇抗體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠0脂酰肌醇抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0脂酰肌醇抗體試劑盒、小鼠0脂酰肌醇抗體elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Herbaridine B 1151511-05-5 中文名： 分子式：C17H20O6 度：% 關(guān)鍵詞： 細胞毒活性; 萘醌; 對照品; 標準品; 微生物代謝產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
小鼠0脂酶A2(PL-A2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Exemestane 中文名：依西美坦 分子式：C20H24O2 度：98.0%
小鼠0脂酶A2(mouse sPLA2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 Bendamustine 中文名：鹽酸苯達莫司汀 分子式：C16H22Cl3N3O2 度：98.0%
小鼠0酸葡萄糖變位酶(PGM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Exemestane 中文名：依西美坦 分子式：C20H24O2
小鼠0酸肌醇3激酶elisa試劑盒 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠0酸肌醇3激酶試劑盒、小鼠0酸肌醇3激酶eisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個月。 Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名： 分子式：C14H18N2O6 度：98.0%
植物玉米素(Z)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Testosterone acetate 1045-69-8 中文名：醋酸睪酮 分子式：C21H30O3
植物吲哚乙酸(IAA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Trenbolone 中文名：群勃龍 分子式：C18H22O2 度：98.0%
植物吲哚乙酸（IAA）ELISAKit ELISA. 96T/48T Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate 23454-33-3 中文名：群勃龍環(huán)己甲基碳酸酯 分子式：C26H34O4
植物血球凝集素M 10mg Trenbolone acetate 中文名： 分子式：C20H24O3 度：98.0%
植物血凝素/凝集素（PHA）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Trenbolone 10161-33-8 中文名：群勃龍 分子式：C18H22O2 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
人細胞特價Ondansetron 中文名：鹽酸昂丹司瓊 分子式：C18H20ClN3O 中文名稱 方法 規(guī)格
Ondansetron 中文名：昂丹司瓊 分子式：C18H19N3O 小鼠25羥基維生素D3(25(OH)D3/25HVD3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Olopatadine 中文名：鹽酸奧洛他定 分子式：C21H24ClNO3 小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Oleandrin 中文名： 分子式：C32H48O9 小鼠維生素C(VC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Olanzapine 中文名：奧氮平 分子式：C17H20N4S 中文名稱 方法 規(guī)格
