產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0935 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 食管腺癌;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
使用方法:
收到細(xì)胞人食管腺癌細(xì)胞直銷后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人食管腺癌細(xì)胞直銷
簡稱:BIC-1
種屬:人
來源:食管腺癌;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0935
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Diosgenin 512-04-9 中文名:薯蕷皂苷元 分子式:C27H42O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: ; 雌激素劑; 黃山藥; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠17羥孕(17-OHP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Dioscin 19057-60-4 中文名:薯蕷皂苷 分子式:C45H72O16 度:98.5% 關(guān)鍵詞: 溶血; 細(xì)胞毒; ; 薯蕷屬; 螺甾烷; 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠乳酸脫氫酶 英文名稱: Mouse Lactate Dehydrogenase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LDH
Dinitolmide 148-01-6 中文名:二硝托胺 分子式:C8H7N3O5 度:98.0% 小鼠白三烯C4 英文名稱: Mouse Leukoiene C4 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LTC4
Dimetridazole 551-92-8 中文名:二甲硝咪唑 分子式:C4H5N3O2 度:99.0% 小鼠脂蛋白酯酶 英文名稱: Mouse Lipopeinlipase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LPL
Dimethylolurea 140-95-4 中文名:雙羥甲脲 分子式:C3H8N2O3 度:98.0% 小鼠白三烯 英文名稱: Mouse leukoiene 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: LT3
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Nandrolone undecylate 862-89-5 中文名:十一酸諾龍 分子式:C29H46O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Epirengynic acid 中文名: 分子式:C8H14O4 度:98.0%
小鼠抗單核細(xì)胞抗體elisa試劑盒 小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠抗單核細(xì)胞抗體試劑盒、小鼠抗單核細(xì)胞抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Epigoitrin 中文名:表告依春 分子式:C5H7NOS 度:98.5%
小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Epiandrosterone 中文名:表雄酮 分子式:C19H30O2 度:98.0%
小鼠抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T Estradiol 50-28-2 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2
Methyl chlorogenate 29708-87-0 中文名:綠原酸甲酯 分子式:C17H20O9 HumanHeatShockProtein60,HSP-60ELISAKit 人熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
3,6'-Disinapoylsucrose 139891-98-8 中文名:3,6'- 二芥子?;崽?/span> 分子式:C34H42O19 Humandeoxyribonucleicproteinaibody,DNP-AbELISA試劑盒人抗脫氧核糖核蛋白抗體(DNP-Ab)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Triethyl 77-93-0 中文名:檸檬酸三乙酯 分子式:C12H20O7 組織LYNA激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 Humanplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit人胎盤生長因子(PLGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Polyhydroxybutyrate 26744-04-7 中文名:聚羥基丁酸酯 分子式:C12H20O7 兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人食管腺癌細(xì)胞直銷Tetrahydrolachnophyllum lactone 56407-87-5 中文名: 分子式:C10H14O2 度:90.0% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Tetraethyl ranelate 58194-26-6 中文名: 分子式:C20H26N2O8S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠抑制素B(INH-B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracycline 60-54-8 中文名:四環(huán)素 分子式:C22H24N2O8 度:97.0% 小鼠促甲狀腺素釋放激素(H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracaine 136-47-0 中文名:鹽酸丁卡因 分子式:C15H25ClN2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠促上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Tetracaine 94-24-6 中文名:丁卡因 分子式:C15H24N2O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA. 96T/48T
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。