產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01052 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 牙齦;上皮細胞 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人牙齦上皮細胞直銷
簡稱:HGE
種屬:人
來源:牙齦;上皮細胞
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01052
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞人牙齦上皮細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Estradiol-3-benzoate-17-butyrate 中文名:雌二醇-3-苯甲酸-17-丁酸酯 分子式:C29H34O4 豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Estradiol valerate 中文名:戊酸雌二醇 分子式:C23H32O3 豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Estradiol hexahydrobenzoate 中文名:環(huán)己甲酸雌二醇 分子式:C25H34O3 豬內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Estradiol heptanoate 中文名:庚酸雌二醇 分子式:C25H36O3 豬球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Estradiol 中文名:雌二醇 分子式:C18H24O2 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(-PCR法) 48T
中文名稱 方法 規(guī)格 Toltrazuril 中文名:托曲珠利 分子式:C18H14F3N3O4S 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tolazoline 中文名:鹽酸妥拉唑林 分子式:C10H13ClN2 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tokinolide B 中文名: 分子式:C24H28O4 度:96.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tofacitinib 中文名:枸櫞酸托法替尼 分子式:C22H28N6O8 度:98.0%
中文名稱 方法 規(guī)格 Tiotropium bromide 中文名:噻托溴銨 分子式:C19H22NO4S2 度:98.0%
Myricadenin A 中文名: 分子式:C39H40O17 度:97.5% 兔子皮質(zhì)醇(Coisol)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Loroglossin 中文名: 分子式:C34H46O18 度:97.0% 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6-O-(p-Hydroxybenzoyl)glucose 中文名:6-O-對羥基苯甲酰葡萄糖 分子式:C13H16O8 度:98.0% 兔子凝血酶受體()ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Cerebroside D 中文名:腦苷脂D 分子式:C43H81NO9 度:96.5% 兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Ethyl chlorogenate 中文名:綠原酸乙酯 分子式:C18H22O9 度:96.0% 兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人牙齦上皮細胞直銷兔緊張素II(rabbit Angiotensin-2) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19
兔緊張素Ⅱelisa試劑盒 兔緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 兔緊張素Ⅱ試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:兔緊張素Ⅱ試劑盒、兔緊張素Ⅱ elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 5-Benzyloxyindole 中文名:5-芐氧基吲哚 分子式:C15H13NO
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 5-Benzyl-1H-tetrazole 中文名:5-芐基-1H-四唑 分子式:C8H8N4O
兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISAKit ELISA. 96T/48T 5-O-Ethylcleroindicin D 中文名: 分子式:C10H16O4 度:%
兔心脂肪酸結(jié)合蛋白(rabbit H-FABP) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine 中文名:5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺 分子式:C9H10N2S
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。