產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0504 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 皮膚;自發(fā)永生;男性 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:Hacat
種屬:人
來源:皮膚;自發(fā)永生;男性
培養(yǎng)基:DMEM
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0504
使用方法:
收到細(xì)胞人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Fenticonazole nitrate 73151-29-8 中文名:硝酸芬替康唑 分子式:C24H21Cl2N3O4S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠鼠總抗氧化能力(T-AOC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Fenofibric acid 42017-89-0 中文名:非諾貝特酸 分子式:C17H15ClO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠鼠病毒抗體(MPV-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Fenbendazole 43210-67-9 中文名:芬苯達(dá)唑 分子式:C15H13N3O2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠鼠病毒(MPV)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Fenazox 61618-27-7 中文名:氨芬酸鈉 分子式:C15H14NNaO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠瘦素(LEP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Felodipine 72509-76-3 中文名:非洛地平 分子式:C18H19Cl2NO4 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子(ECF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(sCD40L)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 中文名: 分子式:C23H19N3O4
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Benzo-18-crown-6 ether 14098-24-9 中文名:苯并-18-冠6-醚 分子式:C16H24O6
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 136285-67-1 中文名: 分子式:C23H19N3O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30(sCD30)Elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Ethyl 2-(((2'-cyano-[1,1'-biphenyl]-4-yl)methyl)amino)-3-nitrobenzoate 136285-67-1 中文名: 分子式:C23H19N3O4
小鼠可溶性白介素-2受體(mouse sIL-2R) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進(jìn)口分裝 Carvedilol 72956-09-3 中文名:卡維地洛 分子式:C24H26N2O4
2-Hydroxyquinoxaline 1196-57-2 中文名: 分子式:C8H6N2O Humaheumatoidfactor,RFELISAKit 人類因子(RF)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Sulfaquinoxaline 59-40-5 中文名:磺胺喹噁啉 分子式:C14H12N4O2S HumancytosolicphospholipaseA2,cPLA2ELISA試劑盒人胞漿型0脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Metamizole 68-89-3 中文名:安乃近 分子式:C13H16N3NaO4S 組織IGF-1R激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
Valsartan 137862-53-4 中文名:纈沙坦 分子式:C24H29N5O3 Humanplateletactivatingfactor,PAFELISAKit人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Metronidazole 443-48-1 中文名:甲硝唑 分子式:C6H9N3O3 兔子(INS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)trans-4-Aminocyclohexanol 27489-62-9 中文名: 分子式:C6H13NO 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠過氧化物酶體增殖物活化受體γ 英文名稱: Mouse Peroxisome Proliferators Activated Receptor γ 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: PPARγ
Tranexamic acid 1197-18-8 中文名:凝血酸 分子式:C8H15NO2 度:98.0% 小鼠誘導(dǎo)型合成酶elisa試劑盒 小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠誘導(dǎo)型合成酶試劑盒、小鼠誘導(dǎo)型合成酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Torososide A 165689-32-7 中文名: 分子式:C38H32O15 度:% 關(guān)鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠內(nèi)皮型合成酶elisa試劑盒 小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠內(nèi)皮型合成酶試劑盒、小鼠內(nèi)皮型合成酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Topiramate 97240-79-4 中文名:托吡酯 分子式:C12H21NO8S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 豚鼠神經(jīng)肽Belisa試劑盒 豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豚鼠神經(jīng)肽B試劑盒、豚鼠神經(jīng)肽Beisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
Tolvaptan 150683-30-0 中文名:托伐普坦 分子式:C26H25ClN2O3 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠游離脂肪酸elisa試劑盒 小鼠游離脂肪酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠游離脂肪酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠游離脂肪酸試劑盒、小鼠游離脂肪酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。