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使用方法：
收到細(xì)胞人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：HASMC(Aorta)

種屬：人

來源：主動(dòng)脈平滑肌

培養(yǎng)基：DMEM

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0490

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門冬氨酸  分子式：C4H7NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞    小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

L-Ascorbic acid  50-81-7  中文名：L-抗壞血酸  分子式：C6H8O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Lapatinib  231277-92-2  中文名：拉帕替尼  分子式：C29H26ClFN4O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Lapachol  84-79-7  中文名：拉帕醇  分子式：  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  ; 抗菌; ; 萘醌; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫  小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Lansoprazole  103577-45-3  中文名：蘭索拉唑  分子式：C16H14F3N3O2S  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝
小鼠細(xì)胞表面抗原分子8   英文名稱：   Mouse Cluster Of Differeiation 8   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   CD8+  Fenbendazole  中文名：芬苯達(dá)唑  分子式：C15H13N3O2S 

小鼠球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Fenticonazole nitrate  73151-29-8  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠球蛋白G(IgG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Fenticonazole nitrate  73151-29-8  中文名：硝酸芬替康唑  分子式：C24H21Cl2N3O4S 

小鼠球蛋白elisa試劑盒   小鼠球蛋白試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠球蛋白試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠球蛋白試劑盒、小鼠球蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Fingolimod   162359-56-0  中文名：鹽酸芬戈莫德  分子式：C19H34ClNO2 

小鼠球蛋白D   英文名稱：   Mouse Immunoglobulin D   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   IgD  Fenazox  中文名：氨芬酸鈉  分子式：C15H14NNaO4  度：98.0%
2-Amino-4'-fluorobenzophenone  3800/6/4  中文名：  分子式：C13H10FNO    HumanPodocalyxin,PCXELISAKit人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Enalapril maleate  76095-16-4  中文名：馬來酸依那普利  分子式：C24H32N2O9    兔子組織因子(TF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Pioglitazone   112529-15-4  中文名：鹽酸吡格列酮  分子式：C19H21ClN2O3S    Rat vascular endothelial cell growth factor C (VEGF-C) ELISA Kit 大鼠內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)ELISA試劑盒

Amlodipine besylate  111470-99-6  中文名：苯磺酸氨氯地平  分子式：C26H31ClN2O8S    humanphosphatidylinositolaibodyIgG/IgM,PIAb-IgG/IgMELISAKit 人0脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Sulfamethoxazole  723-46-6  中文名：磺胺甲噁唑  分子式：C10H11N3O3S    HumanCysticercosisaybody,CYTAbELISA試劑盒人囊蟲病抗體(CYTAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞直銷Venlafaxine  93413-69-5  中文名：文拉法辛  分子式：C17H27NO2    Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑盒

Venlafaxine   99300-78-4  中文名：鹽酸文拉法辛  分子式：C17H28ClNO2    rabbitplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 兔子纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Ondansetron  99614-02-5  中文名：昂丹司瓊  分子式：C18H19N3O    CLIAKitforATF-1(Humanactivatinganscriptionfactor-1)ELISAKit人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1規(guī)格：48T/96T

Ondansetron   99614-01-4  中文名：鹽酸昂丹司瓊  分子式：C18H20ClN3O    線粒體復(fù)合物I蛋白共沉淀分析試劑盒5次

Bupivacaine   18010-40-7  中文名：鹽酸布比卡因  分子式：C18H29ClN2O    Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。