產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE01034 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 食管;上皮細(xì)胞 |
細(xì)胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 永生化食管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)
簡稱:SHEE
種屬:人
來源:食管;上皮細(xì)胞
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE01034
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細(xì)胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動(dòng)蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細(xì)胞永生化食管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作:
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復(fù)洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細(xì)胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應(yīng);余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度:調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Linagliptin 668270-12-0 中文名:利拉利汀 分子式:C25H28N8O2 度:98.0% 小鼠特異生長因子elisa試劑盒 小鼠特異生長因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠特異生長因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠特異生長因子試劑盒、小鼠特異生長因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
73-78-9 中文名:鹽酸利多卡因 分子式:C14H23ClN2O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠壞死因子elisa試劑盒 小鼠壞死因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠壞死因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠壞死因子試劑盒、小鼠壞死因子elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
137-58-6 中文名:利多卡因 分子式:C14H22N2O 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠總補(bǔ)體elisa試劑盒 小鼠總補(bǔ)體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠總補(bǔ)體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠總補(bǔ)體試劑盒、小鼠總補(bǔ)體elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Levodopa 59-92-7 中文名:左旋多巴 分子式:C9H11NO4 度:98.0% 小鼠總腺原酸elisa試劑盒 小鼠總腺原酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠總腺原酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠總腺原酸試劑盒、小鼠總腺原酸elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Levamisole 16595-80-5 中文名:鹽酸左旋咪唑 分子式:C11H13ClN2S 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠腦腸肽elisa試劑盒 小鼠腦腸肽試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠腦腸肽試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠腦腸肽試劑盒、小鼠腦腸肽elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Fingolimod 162359-56-0 中文名:鹽酸芬戈莫德 分子式:C19H34ClNO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISAKit ELISA. 96T/48T Cortisone acetate 1950/4/4 中文名:醋酸可的松 分子式:C23H30O6
小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISAKit ELISA. 96T/48T Fexofenadine 中文名:鹽酸非索非那定 分子式:C32H40ClNO4 度:98.0%
小鼠膜聯(lián)蛋白elisa試劑盒 小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠膜聯(lián)蛋白試劑盒、小鼠膜聯(lián)蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Chimaphilin 中文名:梅笠草素 分子式:C12H10O2
小鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Fenticonazole nitrate 中文名:硝酸芬替康唑 分子式:C24H21Cl2N3O4S 度:98.0%
Arbidol 131707-23-8 中文名:鹽酸阿比朵爾 分子式:C22H26BrClN2O3S Human pulmonary surfacta associated protein B (SP-B) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)ELISA試劑盒
Menthyl-5-(4-amino-2-oxo-2H-pyrimidin-1-yl)-[1,3]oxathiolane-2-carboxylic acid 147027-10-9 中文名: 分子式:C18H27N3O4S rabbittelomerase,TEELISAKit 兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
5-(4-(2-(5-Ethylpyridin-2-yl)ethoxy)benzylidene)thiazolidine-2,4-dione 144809-28-9 中文名: 分子式:C19H18N2O3S CLIAKitforBDNF(MouseBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子規(guī)格:48T/96T
Leflunomide 75706-12-6 中文名:來氟米特 分子式:C12H9F3N2O2 細(xì)菌總ATP酶(totalATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Lafutidine 118288-08-7 中文名:拉呋替丁 分子式:C22H29N3O4S RabbitD-Dimer,D2DELISAKit兔子D二聚體(D2D)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
永生化食管上皮細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)Vilazodone 163521-08-2 中文名:鹽酸維拉唑酮 分子式:C26H28ClN5O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
vibo-Quercitol 488-76-6 中文名: 分子式:C6H12O5 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Venlafaxine 99300-78-4 中文名:鹽酸文拉法辛 分子式:C17H28ClNO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠0脂酰絲酸(PS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Venlafaxine 93413-69-5 中文名:文拉法辛 分子式:C17H27NO2 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠早期生長反應(yīng)因子1 英文名稱: Mouse Early Growth Response Protein 1 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: EGR-1
Varenicline tartrate 375815-87-5 中文名:酒石酸伐侖克林 分子式:C17H19N3O6 度:98.0% 關(guān)鍵詞: 小鼠彈性蛋白 英文名稱: Mouse Elastin 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: ELN
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。