產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0072 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 腎;Golden Retrieve |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 狗 |
包裝規(guī)格 | 1×106 |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 狗腎惡性癥細胞直銷
簡稱:DH82
種屬:狗
來源:腎;Golden Retrieve
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
貨號:AE0072
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法:
收到細胞狗腎惡性癥細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
Myricadenin A 1612239-23-2 中文名: 分子式:C39H40O17 度:97.5% 關鍵詞: 小鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Mumeose K 2132384-01-9 中文名: 分子式:C25H32O15 度:93.0% 關鍵詞: 小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Monobenzone 103-16-2 中文名:莫諾苯宗 分子式:C13H12O2 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠細胞凋亡因子 (mouse Fas) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
Momor-cerebroside I 606125-07-9 中文名: 分子式:C48H93NO10 度:95.0% 關鍵詞: 神經(jīng)酰胺; 腦苷脂; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠細胞凋亡因子配體 (mouse Fas-Ligand) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
m-Nitrohydrocinnamic acid 1664-57-9 中文名: 分子式:C9H9NO4 度:98.0% 關鍵詞: mouse Flt3 Ligand 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furosemide 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S
小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒 小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠牛小腸堿性0酸酶試劑盒、小鼠牛小腸堿性0酸酶elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Ganciclovir 82410-32-0 中文名:更昔洛韋 分子式:C9H13N5O4 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Furosemide 54-31-9 中文名: 分子式:C12H11ClN2O5S 度:98.0%
小鼠牛小腸堿性0酸酶(CIAP)ELISAKit ELISA. 96T/48T Fumaric acid 中文名: 分子式:C4H4O4 度:%
小鼠凝血因子XIII B 英文名稱: Mouse Coagulation Factor XIII B Polypeptide 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: F13B Nandrolone laurate 26490-31-3 中文名:月桂酸諾龍 分子式:C30H48O3
2-Methyl-4-(2-methylbenzoylamino)benzoic acid 317374-08-6 中文名: 分子式:C16H15NO3 CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/MELISAKit大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M規(guī)格:48T/96T
7-Chloro-1,2,3,4-tetrahydrobenzo[b]azepin-5-one 160129-45-3 中文名: 分子式:C10H10ClNO 細菌營養(yǎng)瓊脂平板50個
Nicorandil 65141-46-0 中文名:尼可地爾 分子式:C8H9N3O4 RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit兔子表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Dronedarone 141625-93-6 中文名:鹽酸決奈達隆 分子式:C31H45ClN2O5S 豚鼠白介素10(IL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL10 ELISA Kit
Bisoprolol fumarate 104344-23-2 中文名:富馬酸比索洛爾 分子式:C22H35NO8 Human mannose receptor (MR) ELISA Kit 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
狗腎惡性癥細胞直銷α-Spinasterol 481-18-5 中文名:α-菠甾醇 分子式:C29H48O 度:97.0% 關鍵詞: ; 栝樓; 豆甾烷; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗線粒體抗體(mouse AMA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
α-Lipoic acid 1077-28-7 中文名:α-硫辛酸 分子式:C8H14O2S2 度:98.5% 關鍵詞: 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠抗核抗體(mouse ANA) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
α-Lapachone 4707-33-9 中文名: 分子式:C15H14O3 度:98.0% 關鍵詞: 萘醌; 中藥對照品; 中藥標準品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠緊張素II(mouse ANG II) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝
α-D-Glucose 492-62-6 中文名:α-D-葡萄糖 分子式:C6H12O6 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠脂肪酸合成酶 英文名稱: Mouse Fatty Acid Syhase 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FAS
中文名:佐匹克隆 分子式:C17H17ClN6O3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠促卵泡生成激素 英文名稱: Mouse Follicle Stimulating Hormone 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: FSH
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。