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公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱(chēng)： 人細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱(chēng)：OS-RC-2

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：1640+10%FBS+1%P/S 

狀態(tài)：貼壁生長(zhǎng)

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0493
基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Nandrolone  434-22-0  中文名：諾龍  分子式：C18H26O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠仙臺(tái)病毒（Sendai）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Naftopidil di  57149-08-3  中文名：鹽酸萘哌地爾  分子式：C24H30Cl2N2O3  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)小病毒（CPV）ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Naftifine   65473-14-5  中文名：鹽酸萘替芬  分子式：C21H22ClN  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

N-Acetyl-L-tyrosine  537-55-3  中文名：乙酰酪氨酸  分子式：C11H13NO4  度：98.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

N-Acetyl-L-tryptophan  1218-34-4  中文名：N-乙酰-L-色氨酸  分子式：C13H14N2O3  度：99.0%  關(guān)鍵詞：    小鼠細(xì)胞外基質(zhì)金屬蛋白酶誘導(dǎo)因子/CD147   英文名稱(chēng)：   mouse Exacellular Maix Metalloproteinase Inducer /CD147   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫(xiě)：   EMMPRIN/CD147
小鼠特異性抗原elisa試劑盒   小鼠特異性抗原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠特異性抗原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠特異性抗原試劑盒、小鼠特異性抗原elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Ginsenoyne K  中文名：  分子式：C17H24O3  度：%

小鼠特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Gliclazide  21187-98-4  中文名：格列齊特  分子式：C15H21N3O3S 

小鼠酸性0酸酶elisa試劑盒   小鼠酸性0酸酶試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   小鼠酸性0酸酶試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠酸性0酸酶試劑盒、小鼠酸性0酸酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  Bisdemethoxycucurmin  24939-16-0  中文名：雙去甲氧基姜黃素  分子式：C19H16O4 

小鼠酸性0酸酶(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              L-Aspartic acid  56-84-8  中文名：L-天門(mén)冬氨酸  分子式：C4H7NO4 

小鼠素F(PGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Gimeracil  中文名：吉莫斯特  分子式：C5H4ClNO2  度：98.0%
4-[(4-Methylpiperazin-1-yl) methyl]benzoic acid di  106261-49-8  中文名：甲磺酸伊馬替尼  分子式：C13H20Cl2N2O2    CLIAKitforATM(HumanAtaxiatelangiectasiamated)ELISAKit人擴(kuò)張性突變基因規(guī)格：48T/96T

4-(4-Aminophenyl)morpholin-3-one  438056-69-0  中文名：  分子式：C10H12N2O2    線粒體復(fù)合物II蛋白共沉淀分析試劑盒5次

N-(2,3-Epoxypropyl)phthalimide  161596-47-0  中文名：  分子式：C11H9NO3    RabbitangiotensionⅡ,ANG-ⅡELISAKit兔緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

5-Chlorothiophene-2-carboxylic acid  24065-33-6  中文名：  分子式：C5H3ClO2S    豚鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-13 ELISA Kit

Rivaroxaban  366789-02-8  中文名：利伐沙班  分子式：C19H18ClN3O5S    Human aryl hydrocarbon receptor (AhR) ELISA Kit 人芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒
人細(xì)胞特價(jià)β-Sitosterol  83-46-5  中文名：β-谷甾醇  分子式：C29H50O    Humanepidermalbasememembranezone,EBMZELISAKit 人抗表皮細(xì)胞基底膜抗體(EBMZ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Thevetin B  27127-79-3  中文名：  分子式：C42H66O18    HumanEamoebahistolyticaAigenELISA試劑盒人內(nèi)阿米巴抗原ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

6,7-Dihydroneridienone A  72959-46-7  中文名：  分子式：C21H28O3    組織PKCη激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C)20次

Dregeoside A11  89020-11-1  中文名：  分子式：C55H88O22    HumanParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit人甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白(PTHrP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Stigmasta-4,22-diene-3β,6β-diol  167958-89-6  中文名：  分子式：C29H48O2    兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。