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使用方法：
收到細(xì)胞小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：EAC

種屬：小鼠

來(lái)源：艾氏腹水瘤

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE0813

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Phenformin   中文名：鹽酸苯乙雙胍  分子式：C10H16ClN5    中文名稱   方法   規(guī)格

Phenformin  中文名：苯乙雙胍  分子式：C10H15N5    大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Perospirone   中文名：鹽酸哌羅匹隆  分子式：C23H31ClN4O2S    大鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Periplogenin  中文名：杠柳苷元  分子式：C23H34O5    大鼠雌激素受體(ER)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Periplocoside O  中文名：北五加皮苷O  分子式：C36H56O10    中文名稱   方法   規(guī)格
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Sennoside B  128-57-4  中文名：番瀉苷B  分子式：C42H38O20  度：95.5%  關(guān)鍵詞：  ; 狹葉番瀉葉; 蒽醌苷; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              Tenofovir  147127-20-6  中文名：泰諾福韋  分子式：C9H14N5O4P 

豬纖溶酶原激活物抑制因子elisa試劑盒   豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T     Sennoside A  81-27-6  中文名：番瀉苷A  分子式：C42H38O20 

豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           Sennoside B  128-57-4  中文名：番瀉苷B  分子式：C42H38O20 

豬纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Sertaconazole  中文名：舍他康唑  分子式：C20H15Cl3N2OS  度：98.0%
Retigabine  中文名：瑞替加濱  分子式：C16H18FN3O2  度：98.0%  壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 (AIL/APO 2L )   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Emtricitabine  中文名：恩曲他濱  分子式：C8H10FN3O3S  度：98.0%  壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 1(AIL R1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

Dasatinib  中文名：達(dá)沙替尼  分子式：C22H26ClN7O2S  度：98.0%  壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體 3(AIL R3)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  

Zolpidem  中文名：坦  分子式：C19H21N3O  度：98.0%  細(xì)胞間黏附分子3elisa試劑盒   細(xì)胞間黏附分子3試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   細(xì)胞間黏附分子3試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：細(xì)胞間黏附分子3試劑盒、細(xì)胞間黏附分子3eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

Repaglinide ethyl ester  中文名：  分子式：C29H40N2O4  度：98.0%  兔子纖溶酶原elisa試劑盒   兔子纖溶酶原試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子纖溶酶原試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子纖溶酶原試劑盒、兔子纖溶酶原eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞直銷兔子上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T              6-Aminouracil  中文名：6-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2 

兔子素E2elisa試劑盒   兔子素E2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔子素E2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子素E2試劑盒、兔子素E2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。     Cynanoside F  中文名：  分子式：C41H62O15 

兔子素E2(PGE2)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  9-Anthracenecarboxylic acid  723-62-6  中文名：9-蒽甲酸  分子式：C15H10O2 

兔子素E2(PGE2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  9-Hydroxy-α-lapachone  22333-58-0  中文名：  分子式：C15H14O4 

兔子素E2(PGE2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝  14β,16β-Dihydroxy-3β-(β-D-glucopyranosyloxy)-5α-bufa-20,22-dienolide  1323952-04-0  中文名：  分子式：C30H44O10  度：98.0%  關(guān)鍵詞：  強(qiáng)心劑; 強(qiáng)心苷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。